自然免疫における生体防御レクチンの役割

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13143204
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (B)
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 藤田 禎三 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (20134223)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 水落 次男 東海大学, 工学部, 教授 (90133149) ; 高橋 実 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (00285024) ; 松下 操 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (00165812) ; 安住 薫 北海道大学, 薬学研究科, 助手 (90221720) ; 中村 隆範 香川医科大学, 医学部, 教授 (70183887)
• Keywords: 自然免疫 / 補体 / レクチン / MBL / MASP / フィコリン / 分子進化

Research Abstract

血清中に存在するマンノース結合レクチン(MBL)やフィコリンは自然免疫に働く生体防御レクチンである。本研究の目的は、生体防御レクチンの自然免疫における役割を明らかにするもので、1)MBL-MASP、ficolin/P35-MASPの活性化機構の解明をする。2)フィコリンとMASP,sMAPのノックアウトマウスを作製し、それら分子の自然免疫における役割を解明する。3)ホヤやホヤ同様古典的経路のない円口類のヤツメウナギでのMBL様レクチン、フィコリン、ガレクチン等の構造と機能の解析等を行う。本年度は以下の成果を得た。
1.すでにヒト血清からFicolin/P35を精製し、このFicolin/P35が補体レクチン経路を活性化することを明らかにしてきた。本研究では、Ficolin/P35と類似の構造を持つフィコリン、博多抗原(H-ficolin)を精製し、博多抗原もMASP-1/MASP-2/MASP-3/sMAPと複合体を形成し、補体レクチン経路を活性化することを明らかにした(J.Immunol,in press)。
2.ジーンターゲッティング法により、マウスMASP-1/-3遺伝子の第2エクソンを欠落した遺伝子改変マウス(Masp-1(+/-)と略)を作製し、更にMasp-1(+/-)同士の交配により両染色体に遺伝子変異を持つホモ型MASP-1欠損マウス(以下、Masp-1(-/-))を得た。Masp-1(-/-)はMASP-1とMASP-3をどちらも欠損していた。
3.下等動物におけるレクチン経路の解析:マボヤ体液からフィコリンに相当するレクチンを2種類精製し、そのcDNAのクローニングを行った結果、4種類のフィコリンが得られた(J.Biol.Chem.276,19959,2001)。また、MBL様レクチンGBLがマボヤ補体を活性化し、原始補体系を形成することを明らかにした(J.Immunol 167 4506 2001)。更に、円口類のヤツメウナギにおいて2種類の新規なレクチンを発見し、その構造と機能を解析中である。

Research Products

• [Publications] Kenjo A.: "Cloning and characterization of novel ficolins from the solitany ascidian,Halocynthia noretzi"J.Biol.Chem.. 276(23). 19959-65 (2001)
• [Publications] Hisano S.: "Mesangial IgA2 deposites and lectin pathway-mediated complement activation in IgA glomerulo nephritis"Am.J.Kidney Dis.. 38(5). 1082-8 (2001)
• [Publications] Sekine H.: "An ancient lectin-dependent complement system in an ascidian novel lectin isolated from the plasma of the solitary ascidian"J.Immunol.. 167(8). 4504-10 (2001)
• [Publications] Takeuchi K.: "Epidermal growth factor induces expression of decay-accele-rating factor in human colonic cells via the mitogen-activated"J.Lab.Clin.Med.. 138(3). 186-92 (2001)
• [Publications] Matsushita M.: "Activation of the lectin complement pathway by H-ficolin(Hakata antigen)"J.Immunol.. (印刷中). (2002)
• [Publications] Matsushita M.: "The role of ficolins in innate immunity"Immunobiology. (印刷中). (2002)
• [Publications] Kuroda Y.: "Abnormal IgG galactosylation in MRL-1pr/1pr mice:Pathogenic role in the development of arthritis"Pathol.Int.. 51(12). 909-15 (2001)
• [Publications] Kuroda Y.: "Abnormal IgG galactosylation and arthritis in MRL-Fas(1pr)or MRL-Fas L(gld)mice are under the control of the MRL genetic"FEBS Lett.. 507(2). 210-4 (2001)
• [Publications] Shimizu Y.: "Rapid and simple preparation of N-linked oligosaccharides by cellulose-column chromatography"Carbohydr.Res.. 332(4). 381-8 (2001)
• [Publications] Chabot S.: "Regulation of galectin-9 expression and release in Jurkat T cell line cells"Glycobiology. 12(2). 111-8 (2002)
• [Publications] Sato M.: "Quantification of galectin-7 and its localization in adult rhouse tissues"J.Biochem.(Tokyo). 131(2). 255-60 (2002)
• [Publications] Fujita T.: "Evolution of the lectin pathway and its role in innate immunity"Nature Review Immunology. (印刷中). (2002)