2001 Fiscal Year Annual Research Report
AD患者の脳神経細胞に蓄積する酸化RNAに結合する蛋白のcDNAクローニング
| Project/Area Number |
13210109
|
|---|
| Research Institution | Kyushu University |
|---|
Principal Investigator |
早川 浩 九州大学, 医学研究院, 助手 (70150422)
|
|---|
| Keywords | 酸化ストレス / 転写エラー / 異常蛋白 / RNA結合蛋白 / アルツハイマー病 / 老化 / 品質管理 / Quality Control |
|---|
| Research Abstract |
酸化RNA(8oxoguanine-RNA)に特異的に、且つ強固に結合する蛋白を大腸菌およびマウス脳抽出液中に検出し、大腸菌についてはそのうちの1つがPolynucleotide phosphorylase(PNP蛋白)であることを同定、報告した。(Biochemistry 40,9977-9982 2001)。この遺伝子を欠損した変異株は、酸化ストレスを引き起こすパラコートに対して耐性となるが、遺伝子を導入すると感受性は元のレベルに回復した。このpnp遺伝子にホモロジーをもつ配列が、ESTデーターベース上に多数登録されていることが判ったので、pnp遺伝子情報を元に仮想配列を想定し、目的とするcDNAを決定し、そのDNAを入手した入手したものについて実際にDNA配列を決定したところ、ほぼ予想した配列に該当した。このcDNAからコードされると期待される蛋白の一次配列は大腸菌PNP蛋白と全域にわたってホモロジーがあった。これとは別に、直接結合活性を指標にヒト蛋白を生化学的に検索したところ、1ヶの蛋白を同定することができた。これは既知蛋白であるが、新たな結合活性を有することが明らかになった。
|
