2001 Fiscal Year Annual Research Report
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13216049
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
井上 寛一 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (30176440)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山下 敦子 日本学術振興会, 特別研究員
原口 清輝 滋賀医科大学, 医学部, 助手 (10324576)
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| Keywords | がん抑制遺伝子 / 足場非依存性増殖 / drs遺伝子 |
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| Research Abstract |
本年度、我々はdrs遺伝子による癌化抑制機構と実際のヒト癌発生におけるこの遺伝子の役割を解析し以下の成果を得た。
1.実際のヒト癌組織におけるdrs遺伝子の発現と悪性化との関連をin situ hybridization法、Northern法、Southern法によって検討した。肺癌と前立腺癌で検討し低分化型肺腺癌、肺小細胞癌、前立腺癌、成人T細胞白血病(ATL)患者のリンパ腫においてもdrs mRNAの著しい発現低下が高頻度で認められることを明らかにした。
2.Drs蛋白の機能を明らかにするためにFlag-tagを導入したdrsを高発現させる実験系を確立し、抗Flag抗体による免疫沈降法とペプチドマスフィンガープリント法を用いてDrsと結合する蛋白の検索と同定を行ない現在までに複数のDrsと共沈する蛋白を同定した。これらのうち2つは特異抗体による免疫沈降法によってERでの蛋白の発現調整に関わるGRP78/BiPとα-glucosidase-αsubunitであると確定した。現在これらのDrs結合蛋白の機能とDrsの機能発現との関連について解析を行っている。
3.drs KO mouseを作製するためにdrs genomic cloneを分離し、Null-typeおよびConditional-typeの2種類のターゲッティングベクターを作製した。これらのベクターをES細胞株へ導入後複数のdrs KO ES細胞クローンを得てマウス胚に移植しキメラマウスを複数ライン得ることに成功した。現在これらキメラマウスと野生型マウスとの交配を行い生殖系細胞でdrsがKOされているマウスを作製しその表現型を解析している。
4.Sushi motifを欠くmurant drsを高発現するTgマウスを作製し、その表現型と癌形質の発現に対する影響を解析している。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] T.Kawai et al.: "Isolation of a novel mouse variant of the drs tumor suppressor gene"Cancer Letters. (in press).
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[Publications] Q.Li et al.: "Link of a new type of apoptosis-inducing gene ASY/Nogo-B to human cancer"Oncogene. 20. 3929-3936 (2001)
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[Publications] S.Haraguchi et al.: "Transcriptional regulation of Mesp1 and Mesp2 genes : differential usage of enhancers during development"Mechanisms of Development. 108. 59-69 (2001)
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[Publications] A.Suzuki et al.: "CIS3/SOCS3/SSI3 plays a negative regulatory role in STAT3 activation and intestinal inflammation"Journal of Experimental Medicine. 193. 471-482 (2001)
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[Publications] M.Tamatani et al.: "ORP 150 protects against hypoxia/ischemia-induced neuronal death"Nature Medicine. 7. 317-323 (2001)
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[Publications] T.Osugi et al.: "Cardiac-specific activation of signal transducer and activator of transcription 3 promotes vascular formation in the heart"Journal of Biological Chemistry. 277. 6676-6681 (2002)
