2001 Fiscal Year Annual Research Report
マイクロアレイを用いた神経芽細胞種特性の統合的解析-オーダーメイド療法をめざして-
Project/Area Number |
13307050
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Research Institution | Hiroshima University |
Principal Investigator |
桧山 英三 広島大学, 医学部・附属病院, 助教授 (00218744)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
檜山 桂子 広島大学, 医学部, 講師 (60253069)
高橋 規郎 放射線影響研究所, 遺伝学部, 室長 (40333546)
横山 隆 広島大学, 医学部・附属病院, 教授 (60034104)
山岡 裕明 広島大学, 医学部・附属病院, 助手 (90311810)
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Keywords | 神経芽細胞腫 / マイクロアレイ / CGHアレイ / MYCN / hTERT / 悪性度 / Caspase / オーダーメイド療法 |
Research Abstract |
凍結保存された約300の神経芽細胞腫症例の腫瘍組織と末梢血を用いて,以下の検討を行った。 染色体1.2.3.11.13.17.19.21.22番の大腸菌人工染色体(BAC)クローンから作製した、アレイCGHを作製し、これに腫瘍と末梢血由来のDNAをラベルしてハイブリダイスした。その結果、予後良好な神経芽腫では遺伝子領域の欠失或いは増幅はほとんど認められなかったのに対し、予後不良であった神経芽腫では1番の欠失と17番の増幅を認め、他の領域にも遺伝子量の増減が認められた。さらに胎児神経由来cDNAライブラリー由来のcDNAから作製したアレイと、市販のアレイを用いて、予後良好な神経芽腫と不良な神経芽腫由来のRNAをラベルしてハイブリすると、予後不良の神経芽腫ではMYCN, hTERT, VGEF, Cyclin G1などの発現が増強しており、一方予後良好例ではMMP9, CD44, NGF, Caspase等の発現が増強していた。5例で腫瘍内heterogeneityの検討(5例)や化学療法後の摘出腫瘍での腫瘍細胞の変化の検討(4例)では、腫瘍細胞の存在する領域をマイクロダイセクションシステムで切り出し、hTR, hTERT発現の測定を行い、また、DNA, RNAを抽出、増幅して、ラベルしてアレイ解析した。前者では、2例にRT-PCR,免疫染色でhTERT発現に差を認め、アレイ解析ではhTERTのみならすPDGFR, Cyclin等の増強がみられた。後者では、化学療法前と比較し、遺伝子変化は乏しかったが遺伝子発現ではCaspase, Cadherin等の変化を認めた。退縮,分化が確認多発例、再発例5例では、退縮例ではCaspaseの発現増強がみられ、一方分化例ではNGFなどの成長因子の発現がみられた。これらの既知の遺伝子に加え、多くの未知の遺伝子が発現変動しており、これらについて解析中である。
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Research Products
(17 results)
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[Publications] Hiyama E. et al.: "Clinical utility of telomerase in cancer"Oncogene. 21・1. 643-640 (2002)
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[Publications] 侵襲と免疫: 侵襲と免疫. in press. (2002)
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[Publications] 檜山英三 他: "ショック時におけるサイトカインプロフィール解析のためのマイクロアレイ法の導入とその意義"ショック. 10・8. 677-685 (2002)
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[Publications] Ikeda H., et al.: "Experience with International Neuroblastoma Staging System and Pathology Classification"British Journal of Cancer. in press. (2002)
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[Publications] Hiyama E. et al.: "Immunohistocheical detection of telomerase (hTERT) in human cancer tissues and a subset of cells in normal tissues"Neoplasia. 3・1. 17-26 (2001)
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[Publications] Shya, J.W.et al.: "Telomerase and cancer"Human Molecular Genetics. 10・8. 677-685 (2001)
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[Publications] 山岡裕明 他: "肺転位を有する肝芽腫に対する治療戦略"日本外科系連合学会誌. 26・5. 1317-1323 (2001)
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[Publications] 檜山英三 他: "小児固形悪性腫瘍のテロメラーゼ活性とその意義"広島医学. 54・8. 692-697 (2001)
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[Publications] Hiyama E. et al.: "Biological characteristics of neuroblastoma with partial deletion in the short arm of Chromosome l"Medical and Pediastric Oncology. 36・1. 67-71 (2001)
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[Publications] Mendoza C. et al.: "Allelotype and loss of heterozygosity around the L-myc gene locus in primary lung cancers"Lung cancer. 28・1. 117-125 (2001)
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[Publications] 檜山桂子 他: "肺癌のテロメラーゼと分子標的"内科. 88・5. 889-892 (2001)
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[Publications] 檜山桂子 他: "肺癌の進展・転位に伴う分子遺伝学的変化について示唆に富む症例-剖検例"分子呼吸器病学. 5・4. 359-365 (2001)
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[Publications] NAKAMURA N et al.: "Genetic effects of atomic-bomb radiation-future prospect of DNA and cytogenetic studies"Radiation Biology Research Communication. 36・1. 1-11 (2001)
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[Publications] TAKAHASHI N et al.: "Identification of base substitutions in ten types of rare variants of phosphoglucomutase-1(PGM1) encountered in Japanese"Hum. Biol.. 73・7. 755-762 (2001)
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[Publications] Hiyama K. et al.: "Recent research developments in human genetics"polymorphisms and respiratory diseases (in press). (2002)
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[Publications] Hiyama K. et al.: "Lung Cancer (Methods in Molecular Medicine series)"Detection of telomerase activity in lung cancer tissues (in press). (2002)
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[Publications] Hiyama K. et al.: Non-Rl protocols for L-myc allelotyping and deletion mapping of chromosome 1p in primary lung cancers(in press). (2002)