2002 Fiscal Year Annual Research Report
植物培養細胞の馴化(ハビチュエーション)の分子機構の解明
Project/Area Number |
13440237
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
長田 敏行 東京大学, 大学院・理学系研究科, 教授 (10012519)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西田 生郎 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助教授 (40189288)
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Keywords | 馴化 / オーキシン / 細胞増殖 / 細胞分裂 / 細胞分泌 / 信号伝達 / タバコ培養細胞 |
Research Abstract |
本研究の目的は、タバコ馴化細胞2B-13培養液中に見出された、オーキシンに代わって、細胞分裂を誘導する物質の同定とその遺伝子を確定することである。本年度は、2B-13株より分泌され、オーキシン飢餓により分裂を停止したタバコ培養細胞BY-2の細胞分裂活性を誘導する物質の精製に確実な進歩が見られた。まず、このタンパク質が、糖鎖を持っていることが、細胞分裂活性に必須であることが、グリコシダーゼ処理により示され、また、DEAE-Sephacel樹脂への結合とイオン条件による脱離から、その当電点が8.5と推定された。これらの情報を下に精製に入ったが、ヒドロキシアパタイト、アフィニティーカラム、ゲル濾過クロマトグラフィーの後、SDS-PAGEにかけたところ、銀染色で単一バンドを得ることができ、その分子サイズは30kDaと推定された。一方、同様な物質がBY-2細胞にもあるかどうか探索したところ、上記ヒドロキシアパタイト、アフィニティーカラム、ゲル濾過クロマトグラフィーにより活性物質は精製されたが、そのSDS-PAGEで与える物質は、分子サイズ25と40kDaとの二つであった。特記すべきは、精製されたこれらのタンパク質のいずれもが、オーキシン飢餓BY-2細胞に分裂誘導活性を与えることであった。現在、これらのタンパク質構造解析に入っているが、オーキシンの信号伝達系にあって、オーキシンの下流にあると予想されるこれらのタンパク質は、いずれもこれまでに知見のない新奇物質であるので、その結果が待たれる。現在その解析に入っているとともに、オーキシン信号伝達における新しい経路の提案が出来ると考えている。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Sano, T., Nagata, T.: "The possible involvement of a phosphate-induced transcriptional factor encoded by phi-2 gene from tobacco in ABA-signaling pathways"Plant Cell Physiol.. 43. 12-20 (2002)
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[Publications] Kuwabara, A., Nagata, T.: "Views on developmental plasticity of plants through heterophylly"Recent Res. Devel. Plant Physiol.. 3. 45-59 (2002)
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[Publications] Imai, S. et al.: "An onion enzyme that makes the eyes water"Nature. 419. 685 (2002)
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[Publications] Kumagai, F. et al.: "γ-Tubulin distribution during cortical microtubule reorganization at the M/G1 interface in tobacco BY-2 cells"Eur. J. Cell Biol.. 81. 1-9 (2002)
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[Publications] Nagata, T., Ebizuka, Y.: "Medicinal and Aromatic Plants. 12. In : Biotechnology in Agriculture and Forestry 51 (Nagata, T. and Bajaj, Y.P.S. eds.)"Springer-Verlag. 348 (2002)
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[Publications] Nagata, T., Tabata, S.: "Brassica and Legumes : From Genome Structure to Breeding. In : Biotechnology in Agriculture and Forestry 52 (Nagata, T. et al. eds.)"Springer-Verlag (in press). (2003)
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[Publications] 長田敏行 編: "植物工学の基礎"東京化学同人. 208 (2002)