2001 Fiscal Year Annual Research Report
食糧種子タンパク質モジュレーターに関するプロテオミクスの展開
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13460055
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
阿部 啓子 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (10151094)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松本 一朗 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (00291328)
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| Keywords | ダイズ / アスパラギン酸プロテアーゼ / コムギ / システインプロテイナーゼ / シスタチン |
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| Research Abstract |
食糧種子タンパク質モジュレーターとしてダイズのアスパラギン酸プロテアーゼ(AP)を中心に解析を行い、異なる5種(soyAPα〜soyAPε)のクローンを得た。これらについて発現部位と発現時期(発芽、登熟、葉、根、茎、子葉)をノーザン分析によって検討したところ、soyAPαは、発芽後の種子、葉、根、茎など、植物体のほとんどの部位に発現した。soyAPβは、soyAPαと塩基配列の相同性が極めて高く、soyAPαとほぼ同様の発現パターンを示した。これに対してsoyAPγ,soyAPεは、いずれの部位、ステージにおいても発現が、ほとんど検出されなかった。soyAPδは、発芽過程においてsoyAPαとは対照的に休眠種子及び発芽の初期段階で発現した。次に発現部位をしらべるためにin situハイブリダイゼーションをおこなった。その結果、soyAPαは、種子のうち子葉細胞、表皮細胞、維管束に分化する細胞などの広い範囲で発現したのに対し、soyAPδは、維管束に分化する細胞と胚軸付近に特に強い発現が見られた。このようにsoyAPαとsoyAPδはターゲット分子が異なることが予想され、今後活性測定ならびに立体構造の差異を検討する予定である。
プロテアーゼインヒビターとして小麦のシスタチンについても解析を行った。小麦種子にはWC1, 2, 3, 4の4種のシスタチンが存在し、互いに45〜70%のアミノ酸の相同性を示した。これらのうち、WC1, 2および4は登熟期に発現するものの、その後徐々に減少した。一方、発芽期にはWC1は他の分子種にくらべ明らかに発現が高かった。また、抗体染色から、WC1は種子全面に発現しているのに対し、WC4はアリューロン層と胚のみであった。シスタチンについても生理機能の異なるWC1と4についてタンパク質レベルの解析を行っている。
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[Publications] Kuroda, M.: "Molecular clonig, characterization, and expression of wheat cystatins"Biosci. Biotech. Biochem.. 65. 22-28 (2001)
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[Publications] Ishimaru, Y.: "An actin binding protein, CAP, is expressed in a subset of rat taste bud cells"NeuroReport. 12. 233-235 (2001)
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[Publications] Asano-Miyoshi, M.: "IP3 receptor type 3 is co-expressed with PLCβ2 in a subset of rat taste bud cells that includes the cells expressing two types of taste receptor, T1R and T2R"Chem. Senses. 26. 259-265 (2001)
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[Publications] Matsumoto, I.: "A comparative study of three cranial sensory ganglia projecting into the oral cavity : in situ hybridization analyses of neurotrophin receptors and thermosensitive cation channels"Mol. Brain Res.. 93. 105-112 (2001)
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[Publications] Kishi, M.: "Primary culture of rat taste bud cells that retain molecular markers for taste buds and permit functional expression of foreign genes"Neuroscience. 106. 217-225 (2001)
