PD-1遺伝子破壊マウスにおける自己免疫性拡張型心筋症の発症機構の研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470071
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 湊 長博 京都大学, 生命科学研究科, 教授 (40137716)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 篠原 隆司 京都大学, 医学研究科, 助手 (30322770) ; 本庶 佑 京都大学, 医学研究科, 教授 (80090504) ; 田中 義正 京都大学, 生命科学研究科, 助手 (90280700)
• Keywords: PD-1 / PD-L1 / 抑制性レセプター / 自己免疫疾患 / 自己抗体 / 自己抗原 / 拡張型心筋症

Research Abstract

PD-1はイムノグロブリンファミリーの抑制性免疫レセプターであり、これまでの研究でPD-1遺伝子破壊マウスにはループス様の全身性自己免疫疾患や拡張型心筋症が発症することを示してきた。後者は、血清中の心臓特異的自己抗体とその心筋への特異的沈着が認められることから、臓器特異的自己免疫疾患と考えられる。さらに、PD-1リガンド(PD-L1)に対するモノクローナル抗体を作成し検討した結果、PD-L1は正常の心臓に強く発現されることを確認した。今年度は、心筋に特異的な自己抗体の標的抗原の同定を進めた。正常心臓抽出液を、罹患マウス血清中の自己抗体で免疫沈降により精製し、アミノ酸部分配列を決定した結果、トロポニン-Iであることが判明した。さらに、罹患マウス自己抗体精製がトロポニン-Iに特異的に反応することが確認されたことから、自己免疫性拡張型心筋症の主たる自己抗原であることが強く示唆された。そこで、??に対するモノクローナル抗体を作成し、サンドイッチELISAアッセイを確立し、マウスモデルにおいて自己抗体の定量的検出法となりうることを確認した。予備的ながら、抗トロポニン-I抗体が、パッチクランプ法によりin vitroで心筋の電位に影響を与えることも確認されている。次年度は、同モノクローナル抗体を正常マウスに投与することにより。拡張型心筋症の発症の有無を確認するとともに、抗体による心筋機能への影響の生理学的解析、およびヒトの拡張型心筋症におけるELISAアッセイによる自己抗体の検索も進める予定である。

Research Products

• [Publications] Katagiri, K., Hattori, M., Minato, N., Kinashi, T.: "Rap 1 functions as a key regulator of T cell and APC interactions and modulates T cell-responses"Molecular and Cellular Biology. 22. 1001-1015 (2002)
• [Publications] Miyagawa, F., Tanaka, Y., Yamashita, S., Danno, K., Uehara, B., Mikami, M., Minato, N.: "Essential contribution of germline-encoded residues in Jg1.2 segment to the recognition of nonpeptide antigens by human gd T cells."The Journal of Immunology. 167. 6773-6779 (2001)
• [Publications] Kato, Y., Tanaka, Y., Miyagawa, F., Yamashita, S., Minato, N.: "Targeting of tumor cells for human gamma delta T cells by nonpeptide antigens"The Journal of Immunology. 167. 5092-5098 (2001)
• [Publications] Miyagawa, F., Tanaka, Y., Yamashita, S., Minato, N.: "Essential reguirement of antigen presentation by monocyte-lineage cells for the activation of brimary human gd Tells by aminobisphos phonate antigen"The Journal of Immunology. 166. 5508-5514 (2001)
• [Publications] Nishimura, H., Tanaka, Y., Okazaki, T., Nakatani, K., Hara, M., Nishio, R., Matsumori, A., Hiai, H., Minato, N., Honjo, T.: "Autoimmune dilated cardiomyopathy in PD-1 receptor deficient mice"Science. 291. 319-322 (2001)
• [Publications] Suga, K., Katagiri, K., Harazaki, M., Kinashi, T., Hattori, M., Minato, N.: "CD98 induces LFA-1-mediated cell adhesion in lymphoid cells via activation of"FEBS Letters. 489. 249-253 (2001)
• [Publications] 谷口克, 谷口維紹: "シリーズ・バイオサイエンスの新世紀第13巻 生体防御 一免疫と感染症"共立出版株式会社. 11(44~55) (2001)