TLR4およびRP105分子による病原体認識機構の解明と免疫治療への応用

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470073
• Research Institution: 佐賀医科大学
• Principal Investigator: 木本 雅夫 佐賀医科大学, 医学部, 教授 (40153225)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 三宅 健介 東京大学, 医科学研究所, 教授 (60229812) ; 長澤 浩平 佐賀医科大学, 医学部, 教授 (00108721)
• Keywords: TLR4 / RP105 / MD-1 / ノックアウト / LPS / キメラ蛋白 / トランスフェクタント / MD-2

Research Abstract

(1)TLR4,RP105の分子構造解明:RP105に会合するMD-1分子について,そのノックアウト(MD-1 KO)マウスを作成した.MD-1 KOマウスの脾臓B細胞ではRP105 mRNAが存在するにもかかわらず,その細胞表面にはMD-1分子のみならず,RP105分子の発現も認められなかった.すなわち,MD-1はRP105の細胞表面発現に必須の分子であることが証明された.また,脾臓B細胞のLPSに対する増殖能低下が認められた.これらのことから,MD-1分子はトランスフェクタント細胞においてのみならず,個体レベルにおいてもLPS応答性に構造的・機能的に関与していることが明らかになった.一方,TLR4/MD-2複合体について,ヒト・マウスキメラ蛋白を発現するトランスフェクタント細胞を作成し,LipidAのアナログであるLipidIVIaに対する反応性を解析した.ヒトMD-2はマウスMD-2と異なって,マウスTLR4と会合したとき,LipidAに対する反応を媒介したが,LipidVIaに対する反応を示さなかった.ヒトMD-2/TLR4はLipidVIaに反応しないことはすでに報告されているので,この結果はMD-2分子がTLR4のLPS反応性に直接関与していることを示唆している.
(2)TLR4,RP105のリガンド解析:LPS反応性を媒介する他の分子が存在するか否かについて,引き続き解析をおこなっている.
(3)免疫関連疾患の病態解析:SLE患者,シェーグレン症候群患者の末梢血にRP105陰性B細胞が増加していること,およびシェーグレン症候群の唾液腺に浸潤しているB細胞はRP105陰性の細胞が多いことを明らかにした.この結果は,RP105分子が自己免疫疾患の発症・進展に関与していることを示唆している.

Research Products

• [Publications] Tsuneyoshi N: "Expression and anticoagulant function of the endothelial cell protein C receptor(EPCR) in cancer cell lines"Thromb Haemost. 85(2). 356-361 (2001)
• [Publications] Akashi S: "Human MD-2 confers on mouse Toll-like receptor 4 species-specific lipopolysaccharide recognition"Int Immunol. 13. 1595-1599 (2001)
• [Publications] Nagai Y: "Requirement for MD-1 in cell surface expression of RP105/CD180 and B cell responsiveness to lipopolysaccharide"Blood. (in press).
• [Publications] Miyake K: "Innate recognition of lipopolysaccharide by Toll-like receptor 4/MD-2 and RP1O5/MD-1"J Endotoxin Res. 6(5). 389-391 (2000)
• [Publications] 赤司 祥子: "TLR4を介するLPSシグナリングにおけるMD-2の役割"第31回目本免疫学会総会誌. 31. 232 (2001)
• [Publications] 赤司 祥子: "Toll-like receptorを介するLPS認識におけるMD-2の役割"第60回日本癌学会総会Program. 135 (2001)