| Research Abstract |
Netherton症候群は,重症のアトピー症状(アトピー性皮膚炎,花粉症,高IgE血症,高好酸球血症),魚鱗癬,毛幹異常(bamboo hair)を特徴とする疾患であるが,原因遺伝子であるSPINK5の変異からこれらの表現型が形成される機序は不明である。Netherton症候群におけるアトピー症状は,角質形成異常に起因するバリアー障害なのか,それとも,免疫系におけるSPINK5の機能低下により特定のプロテアーゼ系に脱制御が生じ,その結果としてアトピー症状を引き起こすのか,SPINK5は魚鱗癬の発症機構のみならず,アトピー性皮膚炎の分子遺伝学的な背景を解明する突破口となる得る,極めて興味深い遺伝子である。本年度は,マウスSPINK5構造と遺伝子ファミリーの同定を目的に,マウスSPINK5 cDNA,およびその関連遺伝子のcDNAのクローニングを実施した.マウスセリンプロテアーゼインヒビターのドメイン領域をコードする配列をプローブとして,ビオチン標識し,RecAとともにマウス表皮cDNAプラスミドライブラリーと反応させ,RecAを介して相同配列間のベアリングを行った.ストレプトアビジンマグネティックビーズによるキャプチャー,プラスミド溶出を行い,E. coliを形質転換して,最終的に,コロニーハイブリダイゼーションによって,15の異なるcDNAを得ることができた.今後は,引き続き,これらのcDNAの全塩基配列の決定により,アミノ酸の一次構造の推定,さらに標的遺伝子組み換えのために,129SvJマウスゲノムライブラリーから,これら遺伝子のゲノムDNAのクローニングを実施する予定である.
|
