選択的エストロゲン受容体調節因子(SERM)による動脈硬化予防の作用機構の検討

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470219
• Research Institution: KEIO UNIVERSITY
• Principal Investigator: 猿田 享男 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (70051571)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 栗原 勲 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (90338038) ; 柴田 洋孝 慶應義塾大学, 保健管理センター, 専任講師 (20245484) ; 林 松彦 慶應義塾大学, 医学部, 助教授 (60129608)
• Keywords: エストロゲン受容体 / コアクチベーター / COUP-TF / FHL-2 / SERM

Research Abstract

1)ヒト心臓cDNA libraryより、yeast two-hybrid systemを用いて、SERM存在下におけるERα-interacting proteinのスクリーニングを行なった。SERM結合時にERαとの相互作用が増強する新規蛋白質は見出されなかったが、N末端のA/B/Cドメインのみをbaitとした相互作用する蛋白質を検索したところ、LIM-Only-domain-cotaining factor FHL-2を得た。FHL2は心臓に特異的に高発現を認め、アンドロゲン受容体、転写因子AP-1,CREB,CREM等の転写共役因子(coactivator)として機能することが報告されているが、ERαに関しては未報告である。我々の検討で、FHL-2はエストロゲン依存性に結合を認めたが、ERE-E1b-Luciferaseレポーターを用いたtransient transfection assayにおいては、特にERを介した転写活性に影響を及ぼさなかった。しかし、FHL-2は心筋細胞に特異的発現を認めることから、心肥大の病態との関連が強く示唆された。
2)我々のグループではCOUP-TFIと特異的な相互作用を有するSUMO化酵素のUbc9およびPIAS1の同定に成功したが、これらのERαに対する影響を検討した。その結果、これらの蛋白はERαの転写共役因子(coactivator)としても機能することが明らかとなった。また、EMBO J. (2002 Jull ; 21(13) : 3443-53)にてCOUP-TFIはERαのSer118のリン酸化を介してERαの転写活性化に関与するとの報告があることから、Ubc9-PIAS1-ERα-COUP-TFI complexによる生理学的機能が示唆された。

Research Products

• [Publications] Hirotaka Shibata: "Regulation of Differential COUP-TF-coregulator interactions in adrenal cortical steroidogenesis"Journal of Steorid Biochemistry and Molecular Biology. 85(2-5). 449-456 (2003)
• [Publications] Sakiko Kobayashi: "Ubc9 interacts with chicken ovalbumin upstream promoter-transcription factor I and represses receptor-dependent transcription"Journal of Molecular Endocrinology. 32(1). 69-86 (2004)
• [Publications] 柴田洋孝: "11β-HSDと病態-原発性アルドステロン症"ホルモンと臨床. 51(7). 71-77 (2003)
• [Publications] 柴田洋孝: "遺伝子改変動物を用いた副腎皮質の発生・増殖・ステロイド産生因子の機能解析"ホルモンと臨床. 51(10). 45-51 (2003)
• [Publications] 柴田洋孝: "COUP-TF and novel transcriptional coregulators in adrenal cortical steroidogenesis"ホルモンと臨床(ステロイドホルモン研究の進歩2003). 52(増刊号). 150-157 (2004)
• [Publications] 柴田洋孝: "副腎皮質腫瘍におけるホルモン産生異常と情報伝達系"内分泌・糖尿病科. 18(2). 112-119 (2004)
• [Publications] 柴田洋孝: "今日の治療指針2003(原発性アルドステロン症)"医学書院. 516-517 (2003)