移植糖鎖抗原反応性B細胞の特性解析とその免疫寛容誘導の可能性に関する研究(ABO血液型不適合移植の成績向上および異種移植の臨床導入を目指して)

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470237
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 浅原 利正 広島大学, 医学部, 教授 (70175850)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉岡 伸吉郎 広島大学, 医学部, 助手 (30284194)
• Keywords: 血液型A、B抗原 / Gal抗原 / ABO不適合移植 / B細胞 / 抗体 / 免疫制御

Research Abstract

ヒトリンパ球を用いた移植糖鎖抗原反応性B細胞の解析
健常ボランティアの末梢血リンパ球と腎不全患者の腹膜透析廃液中から採取した腹腔内リンパ球を検体として、蛍光色素でラベルした合成移植糖鎖抗原(血液型A、B抗原あるいはGal抗原)で標識し、フローサイトメーター(FCM)でこれらの抗原を認識しうるB細胞を同定しそのフェノタイプを解析した。その結果、移植糖鎖抗原認識B細胞は腹腔内にはほとんど同定できず、末梢血B細胞中のうちA、BあるいはGal抗原認識B細胞はそれぞれ0.1-0.5%程度存在した。これらの移植糖鎖抗原認識B細胞はいずれもB-1(IgM^<high> CD11b^+)フェノタイプを示し、通常のB-2(IgM^+ CD11b^-)細胞とは異なる亜群に属することが明らかとなった。
ヒト血液型抗原反応性B細胞の免疫制御法を確立するためのin invoモデルの確立
マウス(Balb/c)の血清中にはヒト血液型A抗原に対する自然抗体が存在することをFCMおよびELISAで確認した。Enzyme-linked immunospot(ELISPOT)アッセイでマウス抗A抗体産生細胞の解剖学的分布を解析すると、脾臓と骨髄に局在し、血液型不適合移植ではこれらの細胞を制御する必要があると考えられた。より臨床的なモデルを確立するため、natural killer細胞を抗体で除去し3 Gyの放射線を照射したNOD/SCIDマウスにO型あるいはA型健常ボランティアの末梢血リンパ球を腹腔内あるいは脾臓内に移入した。これらのマウスの血清中にはヒト抗A抗体が検出された。14年度以降はこれらの動物実験系を用い、ヒト血液型抗原反応性B細胞の新たな免疫制御法を検討する。
血液型A抗原反応性B細胞の特異的制御法の可能性について(in vitro実験)
マウス脾細胞にbovine serum albumin(BSA)と結合した合成A抗原を加え、抗BSA抗体と補体とともにさらに培養すると抗A抗体産生細胞が消失した。この結果は、レシピエントにBSA結合合成血液型抗原を投与しその後に抗BSA抗体を投与することでABO不適合移植における抗体性拒絶反応を制御できる可能性を示唆し、14年度以降にin vivoモデルで検討する。

Research Products

• [Publications] Hayamizu K, Shinozaki K, Asahara T et al.: "IL-1-transduction of liver allografts ilduces antiinflammatory monocytes in long-term-surviving hosts"Transplantation Proceeding. 33. 335 (2001)
• [Publications] Fudaba Y, Ohdan H, Asahara T, et al.: "Geranylgeranylacetone, a heat shock protein inducer, prevents primary graft nonfunction in rat liver transplantation"Transplantation. 7(2). 184-189 (2001)
• [Publications] Fudaba Y, Ohdan H, Asahara T, et al.: "High dose of geranylgeranylacetone accumulate HSP72 mRNA in rat liver"Transplantation Proceeding. 33. 978 (2001)
• [Publications] Fan XH, Hayamizu K, Asahara T, et al.: "Emergence of anti-inframmatory monocytes in long-term surviving hosts of IL-10-transduced liver allografts"Cytokine. 13(3). 183-187 (2001)
• [Publications] Hara H, Ohdan H, Asahara A et al.: "The role of mouse stroma in rat haemopoiesis in the xenogeneic rat/mouse bone marrow transplantation chimaeras"Transplantation Proceeding. (in press). (2002)
• [Publications] Zhou W, Ohdan H, Asahara T, et al.: "Characterization of cells producing antibodies against anti-human blood group A : Mouse model for investigating humoral immune responses in ABO incompatible transplantation"Transplantation Proceeding. (in press). (2002)