「Lipo-signal」を用いた脳神経系疾患に対する治療法の開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470291
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 水野 正明 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (70283439)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮地 茂 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (00293697) ; 若林 俊彦 名古屋大学, 医学部, 助教授 (50220835) ; 吉田 純 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 教授 (40158449)
• Keywords: 脳疾患 / Lipo-signal / 細胞療法 / 遺伝子解析

Research Abstract

今年度行った研究によって得られた新たな研究成果の概要を以下に示す。
課題1「Lipo-signal」を用いた脳腫瘍に対する新しい免疫療法の開発:グリオーマ細胞より抽出した脳腫瘍抗原を含む細胞抽出液を、小型の正電荷リポソーム(small unilamellar vesicles : SUV)と混合し、樹状細胞にパルスし、脳内に誘導される全身性免疫の性状を解析した。その結果、腫瘍内浸潤細胞は主にCD8陽性の細胞障害性Tリンパ球であった。この細胞を選別し、宿主に移植したグリオーマ細胞に添加し、その抗腫瘍効果をみたところ、特異的抗腫瘍効果を有していた。同様の実験をメラノーマを対象に行ったところ、ほぼ同じ効果が得られた。このとき、リポソームと一緒に腫瘍抗原を含む細胞抽出液を樹状細胞に添加することで、すみやかにCD80、CD86が増強されることが確認できた。
課題2「Lipo-signal」を用いた神経再生医療の開発:VEGF含有リポソームを神経幹細胞に添加することで血管様細胞への分化が促進されることが共焦点レーザー顕微鏡を使った観察でわかった。現在、細胞の性状解析が進められている。
課題3「Lipo-signal」の投与法の検討:蛍光標識された「Lipo-signal」を血管内カテーテルを介して脳血管内皮細胞に投与したが、脳実質への移行は少なく、血管腔に留まっていた。一方、「Lipo-signal」を定位脳手術的に直接脳内に注入したところ、約1cm径の広がりを見せた。作用時間は、添加する蛋白の種類によりまちまちであった。
次年度はこれらの研究成果を基に、脳神経系疾患モデルを用いた検討を行い、脳神経系疾患の治療法の開発を目指す。

Research Products

• [Publications] Fukui T, Hayashi Y, Fukuhara H, Yamamoto N, Nishikawa M, Mitsudo K, Tohnai I, Ueda M, Mizuno M, Yoshida J.: "Suicide gene therapy for human oral squamous cell carcinoma with adeno-associated virus vector"Oral Oncol. 7. 187-189 (2001)
• [Publications] Yamamoto N, Hayashi Y, Fukuhara H, Fukui T, Nishikawa M, Mitsudo K, Tohnai I, Ueda M, Mizuno M, Yoshida J.: "Basic research on interferon gene therapy for oral squamous cell carcinoma"Oral Oncol. 7. 492-494 (2001)
• [Publications] Nishikawa M, Hayashi Y, Yamamoto N, Fukui T, Fukuhara H, Mitsudo K, Tohnai I, Ueda M, Mizuno M, Yoshida J.: "Cell death of human oral squamous cell caricinoma cell line induced by herpes simplex virus thymidine kinase gene and ganciclovir"Oral Oncol. 7. 578-580 (2001)
• [Publications] Kageshida T, Mizuno M, Ono T, Matsumot K, Saida T, Yoshida J.: "Growth inhibition of human malignant melanoma transfected with the human interferon-b gene by means of cationic liposomes"Melanoma Res,. 11. 337-342 (2001)
• [Publications] Yoshida T, Mizuno M, Taniguchi K, Nakayashiki N, Wakabayashi T, Yoshida J.: "Rat glioma cell death induced by cationic liposome-mediated transfer for the herpes simplex virus thymidine kinase gene followed by ganciclovir treatment"J Surgcal Oncol. 76. 19-25 (2001)
• [Publications] Aoki H, Mizuno M, Natsume A, Tsugawa T, Tsujimura K, Takahashi T, Yoshida J.: "Dendritic cells pulsed with tumor extract-cationic liposomes complex increase the induction of cytotoxic Tlymphocytes in mouse brain tumor"Cancer Immunol Immunother. (in press).