「Lipo-signal」を用いた脳神経系疾患に対する治療法の開発

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470291
• Research Institution: Nagoya university
• Principal Investigator: 水野 正明 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70283439)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮地 茂 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (00293697) ; 若林 俊彦 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教授 (50220835) ; 吉田 純 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40158449)
• Keywords: 脳疾患 / Lipo-signal / 細胞療法 / 遺伝子解析

Research Abstract

昨年度得られた研究成果をもとにさらに研究を進め、以下のような成果を得た。
課題1「Lipo-signal」を用いた脳腫瘍に対する新しい免疫療法の開発:グリオーマ細胞抽出液と小型の正電荷リポソームと混合した「Lipo-signal」は、腫瘍特異的免疫を誘導した。メラノーマモデルでは、転移性病巣にも作用した。
課題2「Lipo-signal」を用いた神経再生医療の開発:VEGF、FGF、NGF、GDNF、bcl-2の各種分化誘導因子あるいは成長因子とリポソームを混合し作製した「Lipo-signal」は、神経幹細胞の分化誘導を促進した。
課題3「Lipo-signal」の投与法の検討:昨年度の検討では、蛍光標識された「Lipo-signal」を血管内カテーテルを介して脳血管内皮細胞に投与した場合、脳実質への移行はほとんど見られなかった。しかし、リポソームの構成成分にlactocerebrosideを添加することで血管からの脳内への移行を高めることができた。次に「Lipo-signal」の細胞内動態を共焦点レーザー顕微鏡で観察した。脂質はエンドサイトーシスで細胞内に取り込まれ、核膜近傍まで30-60分前後で到達した。その後分解されるものと、細胞分裂時の核膜消失に伴い、核内に移行し、染色体と同じ挙動をとるもののあることがわかった。さらに分裂後期の核膜形成に合わせて核外に脂質が能動的に排出される現象が確認できた。
以上のように腫瘍抗原、サイトカイン、抗体、分化誘導因子、成長因子等のシグナル伝達因子をリポソームと絡めた「Lipo-signal」は添加物の生物学的活性を高めたり、組織移行性をコントロールするなど多くの利点を持つことがわかった。

Research Products

• [Publications] Nakanishi T et al.: "Significant antitumoral activity of cationic liposomes containing human interferon-β gene against human renal cell carcinoma"Clin. Cancer Res. (in press).
• [Publications] Ryuke T et al.: "Growth inhibition of subcutaneous mouse melanoma and induction of natural killer cells by liposome-mediated interferon-beta gene therapy"Melanoma Res. (in press).
• [Publications] Yoshida J et al.: "Antitumor effect of an experimental intracranial human glioma by adeno-associated virus vector containing the human interferon-β gene"Jpn J Cancer Res. 93. 223-228 (2002)
• [Publications] Ogaw H et al.: "Reduction of α-galactosyl xenoantigen by expression of endo-β-galactosidase C in pig endothelial cells"Xenotransplantation. 9. 290-296 (2002)
• [Publications] Mizuno M et al.: "Cationic liposomes conjugation to recombinant adenoviral vectors containing herpes simplex virus thymidine kinase gene followed by ganciclovir treatment reduces viral antigenicity and maintains antitumor activity in mouse subcutaneous glioma model"Cancer Gene Ther. 9. 825-829 (2002)
• [Publications] Nobayashi M et al.: "Repeated cationic liposome-mediated gene transfer enhanced transduction efficiency against murine melanoma cell lines"J. Dermatol Sci. 29. 206-213 (2002)
• [Publications] Aoki H et al.: "Dendritic cells pulsed with tumor extract-cationic liposomes complex increase the induction of cytotoxic T lymphocytes in mouse brain tumor"Cancer Immunol Immunother. 50. 463-468 (2002)
• [Publications] Okamoto K et al.: "Process of apoptosis induced by TNF-α in murine fibroblast Ltk-cell : Continuous observation with video enhanced contrast microscopy"Apoptosis. 7. 77-86 (2002)