転写因子SF-1をターゲットとする難治性卵胞発育不全症に対する新たな治療法の開発

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470348
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 生水 真紀夫 金沢大学, 医学部附属病院, 助教授 (30226302)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 村上 弘一 金沢大学, 医学部附属病院, 助手 (20242555) ; 井上 正樹 金沢大学, 医学系研究科, 教授 (10127186)
• Keywords: アロマターゼ / 顆粒膜細胞 / 子宮内膜症 / IL-1β / エストロゲン / 排卵障害

Research Abstract

ヒト顆粒膜細胞および顆粒膜細胞由来樹立細胞株などを用いて、1)GnRH agonistのアロマターゼ発現促進作用、2)nuclear receptor harlf siteへの結合因子について解析した。GnRHアゴニスト(ブゼレリン)を顆粒膜細胞に添加すると、投与後早期より8時間にかけてアロマターゼの転写が亢進し、エストロゲン産生能の亢進が認められる。Exon I-specific RT-PCR法によりこの転写亢進に関与するアロマターゼのプロモーターは性腺型プロモーター(PII)であることが明らかとなった。ブゼレリンのアロマターゼ転写促進効果に対し、FSHの添加は8時間までは相加的に作用したが、24時間以内にこの相加作用は消失した。また、PKC阻害剤の添加はブゼレリンのアロマターゼ促進作用を完全に阻止したが、UO126は部分的な阻止効果を示すに止まった。また、PKA阻害剤は阻止効果を示さなかった。したがって、ブゼレリンのヒト顆粒膜細胞のアロマターゼ転写亢進作用にはPKCの活性化と一部MAPKの活性化が関与しているものと推定された。ついで、PII上にあるnuclear receptor half siteの配列をもつoligo DNAをプローブとして結合因子をEMSAにより解析した。その結果、顆粒膜細胞ではLRH-1とSF-1とが主に結合しており、卵巣間質由来細胞での結合因子はSF-1のみである点で異なっていた。また、顆粒膜細胞が黄体化した顆粒膜黄体細胞ではLRH-1が主な結合因子と考えられた。したがって、顆粒膜細胞では、卵胞発育・成熟・黄体化というステージごとにそのnuclear receptor half siteの結合因子を変えてアロマターゼ発現調節を行っていることが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Shozu, M., Sbastian, S., Takayama, K., Hsu, W.-T., Schultz, M., Neely, K., Bryant, M., Bulun, S.E.: "Estrogen excess associated with novel gain-of-function mutations affecting the aromatase gene"New Engl J Med. 348・19. 1855-1865 (2003)
• [Publications] Shozu M, Murakami K, Segawa T, Kasai T, Inoue M: "Successful Treatment of Symptomatic Uterine Leiomyoma with a Non-Steroidal Aromatase Inhibitor in a Perimenopausal Woman"Fertil Steril.. 79・3. 628-631 (2003)
• [Publications] Shozu M, Murakami K, Inoue M: "Expression of aromatase in leiomyomas of the uterus"Semin Reprod Med.. (In press).
• [Publications] Shimada K, Murakami K.Shozu M, Segawa T, Sumitani H, Inoue M.: "Sex-determining region Y levels in maternal plasma : Evaluation in abnormal pregnancy"J Obstet Gynaecol Res. 30・2. 148-154 (2003)
• [Publications] Bulun SE, Sebastian S, Takayama k, Suzuki T, Sasano, H, Shozu, M.: "The human CYP19(aromatase P450)gene : update on physiologic roles and genomic organization of promoters"J Steroid Biochem Mol Biol. 3-5. 219-224 (2003)
• [Publications] Shozu M, Murakami K, Segawa T, Kasai T, Ishikawa H, Shinohara K, Okada M, Inoue M: "Decreased expression of early growth response-1 and its role in uterine leiomyoma growth"Cancer Res.. (In press).