抗癌剤感受性遺伝子診断法と抗癌剤耐性化癌の遺伝子治療に関する基礎的研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470353
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 田中 哲二 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教授 (80275255)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 尾谷 菜緒子 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (80343424) ; 尾谷 功 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (90343425) ; 梅咲 直彦 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20106339) ; 田中 和東 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手
• Keywords: 抗癌剤耐性化 / 多剤耐性遺伝子 / 子宮癌 / 卵巣癌

Research Abstract

1.樹立抗癌剤耐性株127株の細胞生物学的性状の解析
耐性株127株の各種抗癌剤感受性を定量し、個々の耐性株の細胞生物学的解析(サイトカイン剌激効果、アポトーシス感受性、細胞接着性、表面抗原発現レベル等)を行った。現在は各種抗癌剤感受性と細胞生物学的性状の相関の再解析成果を論文投稿中である。特筆すべき成果は、アポトーシス制御遺伝子のメチル化と抗癌剤耐性化の関連性を世界で初めて見い出したことである(投稿準備中)。
2.抗癌剤感受関連遺伝子候補の同定
抗癌剤耐性株127株の遺伝子発現プロファイリングも行った。データから共通した遺伝子発現異常を検索し、各抗癌剤についての抗癌剤感受性関連遺伝子候補を再確認実験してきた。多くが細胞内シグナル伝達分子のため、各種細胞内シグナル伝達特異的阻害剤を用いて、抗癌剤感受性制御の可能性を検討している。成果の一部は論文投稿中である。
3.RNA発現抑制法による抗癌剤感受性関連度測定と候補遺伝子の選別
(1)発現異常遺伝子の機能的関わりの証明:遺伝子発現プロファイリングで発現異常を認めた遺伝子のRNA発現抑制法を試みた。また、発現異常遺伝子のsense oligo DNAとantisense oligo DNAを作り、それぞれ耐性細胞株培養系に添加してRNA発現抑制法による抗癌剤感受性関連度の測定を行った。しかし予想と異なり、ごく一部の遺伝子以外は明確な関連性の実証には至っていない。
(2)耐性に伴う発現異常の有無の再確認:定量RT-PCR法で耐性株における抗癌剤感受性関連遺伝子の発現異常を確認した。現在その成果の一部が投稿準備中。
4.新しい研究の方向性の追加(感受性遺伝子診断と遺伝子治療の予備実験)
耐性株の実験とは別に、手術摘出癌細胞や各種変異株をヌードマウスに移植し、in vitroの研究成果を参考として、治療的応用の予備実験を開始している。

Research Products

• [Publications] Tanaka T: "Establishment and characterization of the SN38-resistant sublines from human cervical SCC"J Jpn Soc Gynecol Oncol. 20. 210-215 (2002)
• [Publications] Umesaki N, Tanaka T, et al.: "Establishment and Characterization of Anticancer Drug-resistant Subclones Derived from Human Cervical SCC Cells"Proceedings of 9th Biennial Meeting of the International Gynecologic Cancer Society, Italy, Monduzzi Editore. 77-80 (2002)
• [Publications] Tanaka T, et al.: "Molecular and Cellular Mechanisms of Multidrug-resistance in Ovarian Carcinosarcoma Cells"Proceedings of 9th Biennial Meeting of the International Gynecologic Cancer Society, Italy, Monduzzi Editore. 167-171 (2002)