独自に開発したDNAチップを用いた癌と宿主の放射線照射による遺伝子学的変化の検討

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470441
• Research Institution: Tokyo Dental College
• Principal Investigator: 野間 弘康 東京歯科大学, 歯学部, 教授 (40085791)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 鵜澤 一弘 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (30302558) ; 柴原 孝彦 東京歯科大学, 歯学部, 助教授 (50178919) ; 丹沢 秀樹 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (50236775) ; 関 直彦 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助教授
• Keywords: cDNAアイクロアレイ / 口腔癌 / 遺伝子発現

Research Abstract

最初に作製したDNAチップを改良し、口腔扁平上皮だけでなく唾液腺において発現している遺伝子も搭載した改良したもの(2204個の遺伝子を搭載)を作製し、以下の実験を行った。
(1)口腔癌由来癌細胞株、腺癌由来細胞株を培養し、それぞれに対して放射線を照射する。
(2)照射線量を変えて照射を行い、それぞれの細胞株からRNAを抽出する。
(3)放射線照射をしていない細胞株をコントロールとし、照射した細胞株とのマイクロアレイ解析を行った。
以上の実験により、以下の結果が得られた。
(1)放射線照射により発現の増強を認めた遺伝子は22遺伝子あった。
(2)放射線照射により発現の減弱を認めた遺伝子は59遺伝子あった。
現在、同定された遺伝子群についてRT-PCR法などを用いて、confirm実験を行っている。今後口腔癌由来細胞株等を用いて、X線照射量を変化させて、照射X線量の相違による遺伝子発現増強・減弱について観察し、放射線照射におけるDNAの受ける影響について、検討していく予定である。