頭頸部癌細胞由来マクロファージ活性化抑制因子の解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13470445
• Research Institution: Matsumoto Dental University
• Principal Investigator: 山岡 稔 松本歯科大学, 歯学部, 教授 (50064671)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松浦 隆 松本歯科大学, 歯学部, 助手 (10298408) ; 田中 仁 松本歯科大学, 歯学部, 講師 (50267788) ; 上松 隆司 松本歯科大学, 大学院・歯学独立研究科, 助教授 (40203476)
• Keywords: 頭頸部癌 / マクロファージ活性化因子 / α-N-acetylgalactosaminidase / 脱糖鎖 / 免疫抑制

Research Abstract

頭頸部癌細胞抽出液と培養上清中のO-グリカナーゼのであるα-N-acetylgalactosaminidase(α-Nagalase)活性を検討した.exo-α-NaGalase活性は,正常歯肉線維芽細胞,粘膜上皮細胞(HGK)におけるexo-α-NaGalase活性に比べ高値を示した.特に唾液腺癌細胞(HSG)の細胞抽出液と培養上清中のexo-α-NaGalase活性は,HGKに比べそれぞれ54.5倍(p<0.01),84.0倍(p<0.01)高い活性を示した.イオン交換クロマトグラフィーとゲル濾過クロマトグラフィーを用いて精製したHSG由来α-NaGalaseの分子量は48kDaであった.本酵素は,pH4.2においてexo-α-NaGalase活性とともに,endo-α-NaGalase活性(32.0%),α-galactosidase活性(5.0%)を示した.単球/マクロファージの活性酸素産生能とラテックスビーズの貧食能は,GcMAF存在下で高値を示したが,HSG由来α-NaGalaseで処理したGcMAFを作用させた単球/マクロファージでは有意に低値を示した(p<0.01).PNAを用いてGc proteinの脱糖鎖を検討したところ,HSG由来α-NaGalaseは,exo-とendo-α-NaGalase活性を有することが明らかとなった.
以上の結果から,HSGはexoとendo活性を有するα-NaGalaseの産生能が高く,さらにGcMAFまたはGcMAF前駆物質に作用し,マクロファージの活性酸素産生や食食作用などの生物活性を低下させることが明らかとなった.すなわち,HSG由来α-NaGalaseは,正常細胞のconstitutive enzymeと異なる酵素学的性質を有し,本酵素活性によるGcMAFの脱糖鎖が担癌宿主細胞性免疫低下の一要因であると考えられた.

Research Products

• [Publications] Matsuura T., et al.: "Effect of salivary gland adenocarcinoma cell-derived alpha-N-acetylgalactosaminidase on the bioactivity of macrophage activating factor"International Journal of Oncology. 24・3. 521-528 (2004)
• [Publications] Uematsu T., et al.: "Effects of Oral Squamous Cell Carcinoma-derived TGF-β 1 on CD26/DPPIV Expression in T Cells"Anticancer Research. 24・2(印刷中). (2004)
• [Publications] Uematsu T., et al.: "Expression of ATP-binding cassette transporter in human salivary ducts"Arch.Oral Biol.. 48・1. 87-90 (2003)
• [Publications] 堂東亮輔: "唾液腺癌細胞における抗癌剤耐性獲得機構 -MDR1,MRP1およびGSTの発現について-"日本口腔組織培養学会誌. 12・1. 27-28 (2003)