2001 Fiscal Year Annual Research Report
歯周炎の遺伝子診断と免疫グロブリンA受容体ターゲッティング療法の確立
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13557189
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
小林 哲夫 新潟大学, 歯学部・附属病院, 講師 (00215344)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉田 典子 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (30313547)
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| Keywords | 歯周炎 / 遺伝子多型 / 免疫グロブリン / 好中球 / r40kDa OMP / Porhyromomas gingivalis / ターゲッティング療法 |
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| Research Abstract |
1 歯周炎の遺伝子診断:歯周炎重症度・抵抗性との関連、新たな遺伝子多型の発見
慢性歯周炎(CP)の重症度と免疫グロブリンFc受容体(FcR)遺伝子多型の関連性をアレル特異的PCR法にて検索したところ、中等度CP(39名)と比べ重度CP(50名)でFcγRIIIa-158Vアレルの頻度が有意に高かった。また、FcγRIIIa-158VとFcγRIIIb-NA2のアレル組合せとCP患者の重症度との間に強い相関が認められた。70歳高齢者599名を対象に歯周炎抵抗性との関連性も検索したところ、歯周炎感受性群(73名)と比べて、歯周炎抵抗性群(46名)でFcγRIIIb-NA1アレルが有意に高頻度であることを認めた。
好中球特異的FcγRIIIB、FcαRI及びBリンパ球特異的FcγRIIBの遺伝子上塩基配列を解析したところ、それぞれ1カ所(nt221), 2カ所(nt324, 491)及び7カ所(nt688, 689, 692, 694, 699, 725+7, 725+26)に遺伝子多型が認められた。現在、歯周炎との関連性を検索中である。
2 ターゲッテイング療法:ヒト特異的抗体の作製
歯周病原菌P. gingivailsを嫌気培養後、超音波破砕処理・クロマトグラフィーにて40kDaリコンビナント外膜蛋白質(r40kDa OMP)を作製した。同抗原をヒト抗体産生マウス(KMマウス)腹腔に接種・免疫し、脾細胞を回収後、ミエロマ細胞と融合させて、抗r40kDa OMPヒト特異抗体を合計102クローン作製できた。そのうちIgGは99クローンあり、サブクラスでは、IgG1が84クローン、IgG2が11クローン、IgG4が4クローンで、IgAクローンは認められなかった。P. gingivails r40kDa OMP・全菌体に対する結合能をELISA測定し、結合能の高い3クローンについて好中球の貧食活性を調べたところ、ポリクローナル抗体と比べて貪食能が著しく高かった。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Tetsuo Kobayashi et al.: "Effective In Vitro Clearance of Porphyromonas gingivalis by Fcα Receptor I (CD89) on Gingival Crevicular Neutrophils"Infection and Immunity. Vol.69, No.5. 2935-2942 (2001)
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[Publications] Tetsuo Kobayashi et al.: "The Fcγ Receptor Genotype as a Severity Factor for Chronic Periodontitis in Japanese Patients"Journal of Periodontology. Vol.72, No.10. 1324-1331 (2001)
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[Publications] Noriko Sugita et al.: "Increased Frequency of FcγIIIb-NA 1 Allele in Periodontitis-resistant Subjects an Elderly Japanese Population"Journal of Dental Research. Vol.80, No.3. 914-918 (2001)
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[Publications] Kouji Yamamoto et al.: "Evidence for a novel polymorphism affecting both N-linked glycosylation and ligand binding of the IgG receptor IIIB (CD 16)"Tissue Antigens. Vol.57, No.4. 363-366 (2001)
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[Publications] Keiko Yasuda et al.: "Seven single nucleotide substitutions in human Fcγ receptor IIB gene"Tissue Antigens. Vol.58, No.5. 339-342 (2001)
