2001 Fiscal Year Annual Research Report
Pentosan polysulfateの血液脳関門保護作用:抗痴呆薬の可能性
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13670089
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
丹羽 正美 長崎大学, 医学部, 教授 (20136641)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中桶 了太 長崎大学, 医学部, 助手 (50325635)
山下 康子 長崎大学, 医学部, 助手 (80291532)
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| Keywords | 血液脳関門(BBB) / Pentosem polysulfate / 抗痴呆薬 / 血液脳関門 in vitro 再構築薬 |
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| Research Abstract |
血液脳関門(BBB)in vitro再構築系を用いたPentosan polysulfatcの血液脳関門(BBB)保護効果を検証した今年度の成果として、本研究の基盤をなすBBB in vitro再構築系の改良に成功した。生体では、BBBは内皮細胞、ペリサイト、およびアストロサイトより構成されているが、これら3種類の細胞共存培養系から成るBBB in vitro再構築系を,初めて確立した。この系を用いて,第1段階の実験として低酸素によるBBB機能低下に対するPentosan polysulfateの効果を調べた。3週令Wistarラットより前脳を摘出後,酵素・遠心処理し、毛細血管片を分離した。fibronectinとconagen type4をコーティングしたdishに培養することにより内皮細胞を分離し、コーティングをしていないdishに培養することでペリサイトをovergrowthさせた。アストロサイトは2日令Wistarラットよりshaking methodを用いて分離した.これらの細胞を2腔培養系transwellを用いて培養し,BBB in vitro再構築系を作成した。低酸素キットを用いて、6時間の低酸素負荷後に経内皮細胞電気抵抗、経内皮細胞透過性(Evansblue, Sodium fluorescein)を測定した.低酸素負荷により、電気抵抗は約50%に減少し、透過性は亢進しBBBの機能低下が著明であった。6時間の低酸素負荷を、内腔側Prntosan polysulfate 100μg/ml存在下に行ったところ、経内皮細胞電気抵抗の低下が有意に抑制された。また、Sodium fluorcscencc(大分子のparaccllular transport)、およびEvan's blue-albumin(小分子のtransendothelial transport)の透過性の亢進が抑制された。以上、Pentosan polysulfatcは、低酸素負荷によるBBBの機能的破綻を防御することが明らかになった。
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[Publications] Csongor S.Abraham: "Transient forebrain ischemia increases the blood-brain barrier permeability for albumin in stroke-prone spontaneously hypertensive rats"Cellular and Molecular Neurobiology. (in press). (2001)
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[Publications] Noboru Harada: "Endothelin-1 binding to the rat anterior pituitary gland : Formation of an EY_A-ET_B receptor heterodimer?"Cellular and Molecular Neurobiology. (in press). (2001)
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[Publications] Maria A.Deli: "Tissue plasminogen activator inhibits P-glycoprotein in brain endothelial cells"European Journal of Pharmacology. 411. R3-R5 (2001)
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[Publications] Bela Kis: "Aderenomedullin in the cerbral circulation"Peptides. 22・11. 1825-1834 (2001)
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[Publications] Bela Kis: "Adrenomedullin regulates blood-brain barrier functions in vitro"NeuroReport. 12・18. 4139-4142 (2001)
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[Publications] Bela Kis: "Cerebral endothelisl cells are a major sourse of adrenomekullin"Journal of Neuroendocrinology. (in press). (2001)
