気道過敏性発症時の気管支平滑筋におけるRhoA活性化機構の変化

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670101
• Research Institution: Hoshi University
• Principal Investigator: 三澤 美和 星薬科大学, 薬学部, 教授 (20061294)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 千葉 義彦 星薬科大学, 薬学部, 助手 (00287848)
• Keywords: 気管支喘息 / 気道過敏性 / Rho A / Ca^<2+>感受性 / CPI-17

Research Abstract

1.ラット気管支平滑筋におけるACh誘発RhoA translocationに関与するムスカリン受容体サブタイプを検討した。M2受容体遮断薬methoctramineとM3受容体遮断薬4-DAMPを使用したが、4-DAMPのみによってRhoA translocationと気管支収縮が抑制されたことから、AChのこうした一連の作用はM3受容体を介することが明らかになった。
2.ラット気管支平滑筋細胞を酵素液で単離し、スライドガラス上で固定し、RhoAの一次抗体と二次抗体を用いて、細胞内Rhoaの局在を観察した。ACh処置によりRhoAは細胞膜周辺へ移行することが、共焦点レーザー操作蛍光顕微鏡によって明らかにでき、収縮反応との関連性が証明できた。
3.CPI-17は平滑筋特異的phosphatase阻害タンパク質であるが、ラット気管支平滑筋においてこのタンパク質が存在すること、またACh処置により濃度依存的に細胞内CPI-17のリン酸化が亢進し活性化されていることが明らかになった。このリン酸化がprotein kinase C阻害薬であるcalphostin CやROCK阻害薬Y-27632で阻害されることが示され、ACh収縮は一部CPI-17リン酸化を介していることが示唆された。
4.サイトカインであるTNF-αを24時間ラット気管支平滑筋とインキュベートするとhigh K^+の反応には影響ないが、ACh収縮反応を増強することが明らかになった。

Research Products

• [Publications] Chiba, Y.: "Elevated nasal mucosal G protein levels and histamine receptor affinity in a guinea pig model of nasal hyperresponsiveness"Int. Arch. Allergy Immunol.. 127. 285-293 (2002)
• [Publications] Abe, K.: "Amyloid β protein enhances the clearance of extracellular L-glutamate by caltured rat cortical astrocytes"Neurosci. Res.. 45. 25-31 (2003)