マイコプラズマモジュリンM161抗原の構造と機能―TLR2を介する細胞応答について

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670290
• Research Institution: Research Institute, Osaka Medical Center for Cancer and Cardiovascular Diseases
• Principal Investigator: 松本 美佐子 大阪府立成人病センター研究所, 免疫学部門, 主任研究員 (30332456)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 瀬谷 司 大阪府立成人病センター研究所, 研究所長 (10301805)
• Keywords: Innate Immunity / Toll-like receptor / モジュリン / 樹状細胞 / マクロファージ / シグナル伝達 / アダプター分子 / リポプロテイン

Research Abstract

Toll-like receptors(TLRs)は微生物構成成分を認識し、免疫系を活性化する一群の膜受容体である。ヒトでは10種類のTLRがこれまでに報告されている。各TLRは、細胞外のロイシンリッチリピート(LRR)ドメインで微生物成分を認識し、細胞内のTIRドメインを介してシグナルを伝達する。種々の微生物成分に対する免疫応答の相違は、TLRとそれに会合するアダプター分子の組み合わせに起因することが最近の研究より明らかとなってきたが、TLRによるリガンド認識機構に関しては未だ不明な点が多い。特に、TLR2はTLR1,TLR6,CD14などとヘテロダイマーを形成し、特殊な構造のLPSも含め多岐にわたる微生物成分を認識することが知られているが、リガンド認識及びシグナル伝達にco-receptor群がどのように関与するか明らかでない。本研究では、TLR2の細胞外領域の変異体を作製し、種々のTLR2リガンドを用いて認識に重要な領域の同定を行った。また、各変異体におけるTLR6とのヘテロダイマー形成能の有無を調べた。更に、我々が新たに同定したTLR3のアダプター分子であるTICAM-1(TIR-containing adapter molecule-1)のTLR2シグナリングへの関与を調べた。その結果、N末端に2分子の脂質を有するM.fermentans由来リポプロテインM161抗原及びそのリポペプチドMALP-2の認識には、TLR2のN末端領域が必須であること、M161抗原/MALP-2認識後のシグナルはTLR2単独の場合とTLR2/TLR6ヘテロダイマーの場合で異なることが判明した。また、TLR2及びTLR2/TLR6を介したシグナルは、MyD88,Mal/TIRAP依存的であるがTICAM-1非依存的であることを明らかにした。

Research Products

• [Publications] Hirahashi, Matsumoto, et al.: "Acitvation of the human innate immune system by spirulina : Augmentation of interferon gamma production and NK cytotoxicity by oral administration of spirulina"Int.Immunopharmacology. 2. 423-434 (2002)
• [Publications] Kurita-Taniguchi, Matsumoto, et al.: "Molecular assembly of CD46 with CD9, alpha3-beta1 integrin and protein tyrosine phosphatase SHP-1 in human macrophages through differentiation by GM-CSF"Molec.Immunol.. 38. 689-700 (2002)
• [Publications] Masuda, Matsumoto, et al.: "High levels of RAE-1 isoforms on mouse tumor cell lines assessed by the antipan-Rae-1 polyclonal antibody confers tumor cell cytotoxicity on mouse NK cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 290. 140-145 (2002)
• [Publications] Matsumoto, M., et al.: "Establishment of a monoclonal antibody against human Toll-like receptor 3 that blocks double-stranded RNA-mediated signaling"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 293. 1364-1369 (2002)
• [Publications] Seya T., M.Matsumoto: "Molecule in Focus : A lipoprotein of Mycoplasma fermentans confers host immune activation through Toll-like receptor2"J.Biochem.Cell Biol.. 34. 901-906 (2002)
• [Publications] Murabayashi, Matsumoto, et al.: "Susceptibility of human dendritic cells to measles virus depends on their activation stages in conjunction with the level of CDw150 : role of Toll stimulators in DC maturation and V amplification"Microbes Infect. 4. 785-794 (2002)
• [Publications] Haseki, Matsumoto, et al.: "TLR-mediated tyrosine phosphorylation of paxillin via MyD88-dependent and-independent pathways"Eur.J.Immunol.. 33. 740-747 (2003)
• [Publications] Uehori, Matumoto, et al.: "Simultaneous blocking of human Toll-like receptor 2 and 4 suppresses myeloid dendritic cell activation induced by Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin(BCG)-peptidoglycan(PGN)"Infect.Immun.. (in press).
• [Publications] 押海裕之, 松本美佐子他: "RNA interference(RNAi)を用いた哺乳類細胞での遺伝子ノックアウト"臨床免疫(実験技術). 120. 91-95 (2002)
• [Publications] 松本美佐子, 瀬谷司: "微生物成分を用いたヒト樹状細胞の制御"Molecular Medicine. (印刷中).
• [Publications] 赤沢隆, 松本美佐子, 瀬谷司: "アジュバントを利用した樹状細胞の活性化と癌免疫療法への応用"現代医学社. (印刷中).
• [Publications] 松本美佐子: "自然免疫にかかわるToll-like receptor群の非自己認識機構"生物物理244号別刷. 244. 295-300 (2003)
• [Publications] 瀬谷司, 押海裕之, 松本美佐子: "TICAM-1 Interferon-βを誘導する新規Toll-like receptorアダプター分子"医学のあゆみ. (印刷中).