造血幹細胞移植後GVHDにおいて出現するOX40+T細胞の特性に関す研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670454
• Research Institution: KYOTO UNIVERSITY
• Principal Investigator: 堀 利行 京都大学, 医学研究科, 講師 (70243102)
• Keywords: OX40 / OX40 ligand / gp34 / Bone marrow transplantation / Graft-versus-Host Disease(GVHD) / Allo reactivity / Dendritic cell

Research Abstract

われわれは、最近、allo HSCT後GVHDとくに慢性GVHDを発症した症例の末梢血に、TNF受容体ラァミリーに属するOX40を発現した末梢血T細胞が出現し、その割合がGVHDの病勢と正の相関を示すことを見いだした(A. Kotani et al. Blood 98:3162,2001)。本研究では、これらのOX40_+ T細胞の特性を明らかにし、GVHDの病態生理への関与について検討することを目的とする。本年度は、GVHD病変組織の浸潤細胞の同定と、in vitroでのallo免疫応答におけるOX40/OX40Lの役割について以下の解析を行った。
GVHD病変組織におけるOX40_+ T細胞とOX40L_+細胞の同定
allo HSCT後慢性GVHDを発症した患者の病変組織の生検標本を対象にして、免疫組織染色を行なってOX40_+細胞.およびOX40L_+細胞についてその局在と細胞種の特定を行った。その結果、病変組織においてCD4_+ T細胞とCD8_+ T細胞の両者OX40を発現していること、また、OX40L_+細胞には樹状細胞(DC)以外にtryptase陽性のマスト細胞と思われる細胞も含まれることが明らかとなった。後者についてはin vitroで培養したマスト細胞にCaイオノフォアとPMAの刺激でOX40Lの発現が誘導されることを確認した(A. Kotani et al. In preparation)。
allo T細胞免疫応答におけるOX40/OX40Lの役割
Mixed leukocyte reaction(MLR)の系を用いて、in vitroでallo T細胞免疫応答におけるOX40/OX40Lの役割を解析した。精製したCD4_+ T細胞をallogeneic DCで刺激するときにCTLA-4-Igを加えておくとT細胞の増殖とOX40の発現がともに強く抑制されるが、抗OX40L抗体の添加によってもT細胞の増殖が著明に抑制されることを観察した。したがって、CD4_+ T細胞のallo免疫反応において、OX40の発現はTCRからの刺激とCD28からのシグナルに依存しているが、CD28シグナルの後の最終的なサイトカイン産生とT細胞の増殖反応の強さをOX40のシグナルが決定していることが強く示唆された(N. Ukyo et al. Immunology, in press)。
以上の結果からGVHDや移植臓器の拒絶などのallo免疫反応にOX40/OX40L系が重要な役割を果していて、これを制御することが有効な治療法となりうると考えられた。

Research Products

• [Publications] Ai Kotani, et al.: "Singnaling of gp34 (OX40 ligand) induces vascular endothelial cells to produce a CC chemokine RANTES/CCL5 :"Immunol. Lett.. 84. 1-7 (2002)
• [Publications] Akane Kunitomi, et al.: "OX40 signaling renders adult T cell leukemia cells resistant to Fas-induced apoptosis"Int. J. Hematol.. 76. 260-266 (2002)
• [Publications] Ai Kotani, et al.: "Myasthenia gravis after bone marrow transplantation treated with mycophenolate mofetil monitored by peripheral blood OX4O^+ CD4^+ T cells"Eur. J. Haematol.. 69. 318-320 (2002)
• [Publications] Naoya Ukyo, et al.: "0X40 signaling is crucial for induction of alloreactive human T cell response"Immunology. (発売予定). 226-231 (2003)