プロテアーゼ阻害剤を用いた肝線維症/肝硬変・肝再生不全の改善

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670579
• Research Institution: The Institute of Physical and Chemical Research
• Principal Investigator: 小嶋 聡一 理化学研究所, 分子細胞生物学研究室, 先任研究員 (10202061)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 奥野 正隆 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (10204140) ; 鈴木 康弘 理化学研究所, 分子細胞生物学研究室, 基礎科学特別研究員 (60332277)
• Keywords: 肝線維症 / 肝硬変 / 肝再生不全 / TGF-β活性化 / プラスミン / 血漿カリクレイン / プロテアーゼ阻害剤 / 肝星細胞

Research Abstract

1 プロテアーゼ阻害剤FOY305によるラット肝線維化抑制の分子機構:FOY305はin vitro培養系においては、肝星細胞表面プラスミンによるTGF-β活性化反応の阻害、並びに肝星細胞におけるTGF-βのシグナル伝達阻害の活性を示すとともに、ブタ血清投与ラット肝線維化モデルや四塩化炭素投与ラット肝線維化モデルにおいてTGF-βの産生を抑え肝線維化を抑制する。FOY305のin vivoモデルにおける作用がプラスミンのTGF-β活性化反応の阻害によることを、FOY投与ラットの肝臓にuPA発現ベクターを打つことによってFOYの効果がレスキューされることにより示した。
2 FOY305によるTGF-βのシグナル伝達阻害の分子機構:FOYはTGF-βのシグナル伝達因子であるSmadの働きを阻害することによりPAI-1プロモーター活性化を抑制するらしいことがわかった。
3 肝再生不全時に働く新規TGF-β活性化酵素の同定とその制御:LPS刺激クッパー細胞から放出されるTNF-αが肝星細胞に働くと、同細胞表面上における血漿カリクレイン活性が亢進し、血漿カリクレインの作用でLAPの限定分解が起こり、活性型TGF-βが生成、肝再生を抑制していることがわかった。血漿カリクレインの特異的阻害剤や抗体は、活性型TGF-βの生成を抑制することで、リポ多糖前投与によるマウス部分肝切除後の肝再生不全を改善した。新たな生理的TGF-β活性化酵素として血漿カリクレインが働いていることが強く示唆された。

Research Products

• [Publications] Okuno, M. et al.: "Prevention of rat hepatic fibrosis by the protease inhibitor, camostat mesilate, via reduced generation of active TGF-β"Gastroenterology. 120(7). 1784-1800 (2001)
• [Publications] Shimada, J et al.: "Transactivation via retinoic acid receptor/retinoid X receptor-Sp1 interaction : characterization of binding between Sp1 and GC box motif."Mol. Endocrinol.. 15(10). 1677-1692 (2001)
• [Publications] Matsushima-Nishiwaki, R et al.: "Phoshorylation of retinoid X receptor α at serine 260 impairs its metabolism and function in human hepatocellular carcinoma."Cancer Res.. 61(20). 7675-7682 (2001)
• [Publications] Okuno, M. et al.: "Chemoprevention of hepatocellular carcinoma-concept, progress, and perspectives."J. Gastroenterol. Hepatol. 1329-1335.. 16(12). 1329-1335 (2002)
• [Publications] Adachi, S. et al.: "Phosphorylation of retinoid X receptor suppresses its ubiquitin in human hepatocellular carcinoma."Hepatology. 35(2). 332-340 (2002)
• [Publications] Akita, K. et al.: "Impaired liver regeneration in mice by lipopolysaccharide via TNF-α/kallikrein-mediated activation of latent TGF-β."Gastroenterology. (in press). (2002)
• [Publications] Okuno, M. et al.: "Trends in Gastroenterology and Hepatology"Springer-Verlag, Tokyo,.. 361-363 (2001)