2003 Fiscal Year Annual Research Report

眼咽頭筋ジストロフィーの発症機構―モデル動物の開発

Research Project

Project/Area Number	13670657
Research Institution	Kumamoto University
Principal Investigator	宇山英一郎熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (90185075)
Keywords	眼咽頭筋ジストロフィー / PABPN1(PABP2) / アラニン異常伸長 / トランスジェニックマウス / 核内封入体 / チキンβアクチン(CAG)プロモーター / アポトーシス / 嚥下障害
Research Abstract	【目的】眼咽頭筋ジストロフィー(OPMD)は40歳以降に発症し,眼瞼下垂,嚥下障害,四肢筋力低下を主徴とする常染色体優性疾患で,原因遺伝子はpoly(A)-binding protein nuclear 1(PABPN1;PABP2)である.その発生機序の解明と治療法開発を目的として,OPMDのモデルマウスを作製した.【方法】正常PABPN1 cDNAと(GCG)_9を持つ変異PABPN1 cDNAをぞれぞれ心筋,骨格筋で強く発現するpCAGGS vectorにクローニングし,直鎖状にしたトランスジーンをマウス受精卵にmicroinjectionにて導入した.得られたマウス(TgM)はPCR,サザンブロット解析にて導入遺伝子の有無を確認.その後F1以降のノザンブロット解析にて導入遺伝子の発現解析を行い,ウエスタンブロット法にて蛋白の発現を確認し,TgMラインを樹立した.得られたTgMについては,表現型の検討のため,金網捕まりテストを行った.また,組織学的検討として,ひらめ筋,咽頭筋,外眼筋のH.E.染色,免疫染色,トルイジンブルー染色を行い,筋線維の変化について検討を加え,電顕にて核内封入体の検索を行った.【結果】正常PABPN1 cDNAを発現しているTgMを2ライン,変異PABPNI cDNAを発現しているTgMを3ライン得た.各ラインは外観上の変化は特に認めないが,変異PABPN1蛋白を強く発現しているラインにおいては,体重が野生型(WT)と比較して有意に軽く,金網捕まりテストにて筋力低下を認めた.また,同ラインではH.E.染色において,咽頭筋・外眼筋優位の筋病変,rimmed vacuoleを認め,免疫染色にてPABPN1の核内凝集像を認めた.これはトルイジンブルー染色にて明るい封入体を形成し,電顕ではヒトOPMDに特異的な核内封入体と酷似した像を呈した.【結語】OPMDモデルマウスを世界で最初に確立した.本症の発症機序の解明と治療法の開発に,今後高い有用性を発揮するものと期待される.

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] 宇山英一郎: "筋ジストロフィー:疾患モデル動物-病因解析での役割と限界"医学のあゆみ. 205. 280-284 (2003)
[Publications] Hino H, et al.: "Myopathy phenotype in transgenic mice expressing mutated PABPN1 as a model of oculopharyngeal muscular dystrophy"Hum Mol Genet. 13. 181-190 (2004)
[Publications] Bao Y-P, et al.: "Congo red, doxycycline and HSP70 overexpression reduce aggregate formation and cell death in cell models of OPMD"J Med Genet. 41(in press). (2004)
[Publications] Uyama E, et al.: "A Japanese family with FEOM1-linked congenital fibrosis of the extraocular muscles type 1 associated with …"Neuromusc Disord. 13. 472-478 (2003)
[Publications] Yamada K, et al.: "Heterozygous mutations of the kinesin KIF21A in congenital fibrosis of the extraocular muscles type 1 (CFEOM1)"Nature Genetics. 35. 318-321 (2003)
[Publications] Santa Y, Uyama E, et al.: "Genetic, clinical and pathological studies of CADASIL in Japan : a partial contribution of Notch3 mutations and implications of smooth muscle cell degeneration"J Neurol Sci. 212. 79-84 (2003)
[Publications] 宇山英一郎: "新臨床内科学〔コンパクト版〕第3版"筋強直性ジストロフィー/先天性筋強直症(分担)医学書院. 669-671 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

眼咽頭筋ジストロフィーの発症機構―モデル動物の開発

Principal Investigator

宇山 英一郎 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (90185075)

Research Products

[Publications] 宇山英一郎: "筋ジストロフィー:疾患モデル動物-病因解析での役割と限界"医学のあゆみ. 205. 280-284 (2003)

[Publications] Hino H, et al.: "Myopathy phenotype in transgenic mice expressing mutated PABPN1 as a model of oculopharyngeal muscular dystrophy"Hum Mol Genet. 13. 181-190 (2004)

[Publications] Bao Y-P, et al.: "Congo red, doxycycline and HSP70 overexpression reduce aggregate formation and cell death in cell models of OPMD"J Med Genet. 41(in press). (2004)

[Publications] Uyama E, et al.: "A Japanese family with FEOM1-linked congenital fibrosis of the extraocular muscles type 1 associated with …"Neuromusc Disord. 13. 472-478 (2003)

[Publications] Yamada K, et al.: "Heterozygous mutations of the kinesin KIF21A in congenital fibrosis of the extraocular muscles type 1 (CFEOM1)"Nature Genetics. 35. 318-321 (2003)

[Publications] Santa Y, Uyama E, et al.: "Genetic, clinical and pathological studies of CADASIL in Japan : a partial contribution of Notch3 mutations and implications of smooth muscle cell degeneration"J Neurol Sci. 212. 79-84 (2003)

[Publications] 宇山英一郎: "新臨床内科学〔コンパクト版〕第3版"筋強直性ジストロフィー/先天性筋強直症(分担)医学書院. 669-671 (2003)

宇山英一郎熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (90185075)