孤発性アルツハイマー病におけるRNAエディティング異常の検討

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13670662
• Research Institution: Osaka City University
• Principal Investigator: 詫間 浩 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (00326258)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 富山 貴美 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (10305633) ; 森 啓 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10159189)
• Keywords: 弧発性アルツハイマー病 / RNA editing / プレセニリン / APP / ニカストリン

Research Abstract

本研究ではアルツハイマー病の大多数を占める弧発例の発症機構として、post-transcriptional modificationの1つとしてRNA editingの可能性を考え、アルツハイマー病患者血液を用いた分析を実施した。
分析対象は正常6例、弧発例11例よりPolyATract System 1000 (Promega社)で抽出したmRNAを鋳型にしReverse Transcription System (Promega社)により逆転写を実行した。得られたDNAを鋳型としたPCRを行い、さらにDNA Sequencing Kit (BigDye Terminator Cycle Sequencing Ready Reaction、ABI社)を用いて塩基配列を(ABI PRIZM 310型)決定した。各PCRに使用したprimerは、RTがキット付属のoligo (dT)15primer、および3つのアルツハイマー病関連遺伝子(プレセニリン1、APP(アミロイド前駆体蛋白)、ニカストリン)をカバーする特異的primersである。すべてインフォームドコンセントをとり、倫理委員会での承認の下で実施した。
正常例ではいずれの遺伝子も変異がなかったが、27才発症という早期発症型アルツハイマー病では、プレセニリン1に新遺伝変異を発見した。この変異をもつ患者は視覚失認を示す興味ある所見を示した。この臨床所見はMRI、PET、SFECTによる解析によって、部分的にであるが、資格領野の機能低下をみた。さらにこの変異によって、アミロイド蛋白産生への効果を検討したところ、Aβ42のみの選択的亢進を見出し、これが痴呆発症の病因と同定した。

Research Products

• [Publications] Takuma, H., Sakurai, M., Kanazawa, I.: "In vitro formation of the cortico-spinal synapses in organotypic slice co-culture"Neuroscience. 109. 359-370 (2002)