2003 Fiscal Year Annual Research Report
乳癌のエストロゲン枯渇耐性獲得におけるエストロゲン受容体の機能制御機構
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13671169
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| Research Institution | Radiation Effects Research Foundation |
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Principal Investigator |
江口 英孝 財団法人放射線影響研究所, 放射線生物学/分子疫学部, 研究員 (00260232)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
正村 滋 東京歯科大学, 病院・助教授 (40190342)
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| Keywords | 乳癌 / エストロゲン |
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| Research Abstract |
エストロゲン依存性の増殖を示すMCF-7B細胞を長期間エストロゲン枯渇下で培養することにより得られた耐性株MCF-7Dと親株であるMCF-7Bにおけるエストロゲンレセプターα(ERα)の転写活性の違いをすでに見出している。本年度はこの制御を明らかにするためにMCF-7DにERαの転写活性化ドメインであるAF-1あるいはAF-2とGal4DBDのDNA結合ドメインを連結したキメラ遺伝子を安定に発現する形質転換株を用いて、さらに詳細な検討を行った。1)内在性ERαと同様にGAL4DBD AF-2安定形質転換株MCF7-D細胞はより低濃度(10^<-9>M)のE2でAF-2ドメイン由来転写活性が飽和する。2)E2存在下でMCF7-D細胞ではGAL4DBD AF-1転写活性がICI濃度依存的に抑制される。3)内在性ERαとは異なり、E2枯渇条件下でAF-2ドメインによる転写活性はICI耐性に大きな差異は認められなかった。以上よりMCF-7D細胞では、ERαの持つ2つのドメインAF-1 AF-2はそれぞれE2に対する応答性があることが示唆された。一方、EREをモチーフとするDNA-pull down実験により、E2存在下・非存在下におけるMCF-7DとMCF-7Bの間に転写活性化に関与する蛋白質コンプレックスに違いが認められた。さらにGAL4DBD AF-2安定形質転換株を用いてGal4DBDをモチーフとするDNA-pull down実験を行ったところ、両細胞株間で著しい違いは認められなかった。また、細胞生物学的な実験によりMCF-7D細胞におけるMAPKの恒常的活性化が直接的にERαの活性化を担っている事を明らかにしており、ERαの転写活性化がリン酸化により制御されており、エストロゲン枯渇耐性獲得において共役因子のリクルートが関与していることが示唆された。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Omoto Y: "Estrogen receptor (ER) beta1 and ERbetacx/beta2 inhibit ERalpha function differently in breast cancer cell line MCF7."Oncogene. 22・32. 5011-5020 (2003)
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[Publications] Hayashi SI: "The expression and function of estrogen receptor alpha and beta in human breast cancer and its clinical application."Endocr Relat Cancer. 10・2. 193-202 (2003)
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[Publications] Sakamoto T: "Estrogen receptor-mediated effects of tamoxifen on human endometrial cancer cells."Mol Cell Endocrinol. 192・1-2. 93-104 (2002)
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[Publications] Matsuyama S: "Estrogen receptor beta is expressed in human stomach adenocarcinoma"J Cancer Res Clin Oncol.. 128・6. 319-324 (2002)
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[Publications] Santen RJ: "Adaptive hypersensitivity to estrogen : mechanism for superiority of aromatase inhibitors over selective estrogen receptor modulators for breast cancer treatment and prevention"Endocr Relat Cancer. 10・2. 111-130 (2003)
