トロンボモジュリンの動脈硬化症における病態生理学的意義の研究

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13671180
• Research Institution: 福井医科大学
• Principal Investigator: 笈田 耕治 福井医科大学, 医学部附属病院, 講師 (90203687)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石井 秀美 昭和薬科大学, 薬学部, 教授 (50102710)
• Keywords: トロンボモジュリン / 内皮細胞 / 動脈硬化症 / 酸化LDL / 単球マクロファージ / PPARγ / スタチン

Research Abstract

実績1:酸化LDLは血管内皮細胞のトロンボモジュリン(TM)発現を強力に抑制する(J Biol Chem,271,8458-8465,1996)。本研究では、酸化LDLのTM発現抑制機序について検討した。その結果、酸化LDLのリン脂質成分が、内皮細胞のTM発現を抑制した。酸化PAPC(1-palmitoyl-2-arachidonyl-sn-glycero-3-phosphocholine)は著明にTM発現を抑制したが、nativePAPCではTM発現は変化しなかった。酸化LDLや酸化PAPCで処理したHUVECs、の核蛋白はRARb、RXRa、Sp1、Sp3の発現量が低下しており、更にTMプロモーター領域に存在するDR4およびSp1 binding elementへの核蛋白の結合が有意に低下していた。以上より、酸化LDLによるTM転写抑制は、酸化LDLに含まれる酸化PAPCがRARb-RXRa複合体のTMプロモーター内のDR4領域への結合やSp1、Sp3のSp1領域への結合を低下させることによるものと推察された。実績2:内皮細胞に限らず、単球-マクロファージにもTMの発現が認められるがその意義は明らかではない。THP-1細胞はTMを発現しており、酸化LDLによりその発現が増強される一方、PPARγのリガンドであるpioglitazoneによってもTMの発現が増強されることを明らかにした。実績3:スタチンによる血管内皮細胞のTM発現機序につき検討した。その結果、スタチンは濃度および時間依存性にTM蛋白量ならびにmRNA量を増加した。geranylgeranyltransferase-I阻害薬のGGTI-286、Rho蛋白familyの不活化薬であるClostridium difficile Toxin B(TcdB)によりTM発現は増強したが,farnesyltransferase阻害薬であるFTI-276ではTM発現は変化しなかった。Rho蛋白の中で、Rho-A, Bを阻害薬するClostridium botulinum C3 exoenzymeやRho associated kinase阻害薬のY-27632ではTM発現は変化せず、RacとCdc42を阻害するClostridium sordellii lethal toxinにて著明に増加した。以上より、スタチンによるTMの発現増加はRho蛋白のRacあるいはCdc42の阻害を介したものであることが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Kanehara H, Tohda G, Oida K.Suzuki J, Ishii H, Miyamori I: "Thrombomodulin expression by THP-1 but not by vascular endothelial cells is upregulated by pioglitazone"Thromb Res. 108(4). 227-234 (2002)
• [Publications] Masamura K, Oida K, Kanehara H, Suzuki J, Horie S, Ishii H, Miyamori I.: "Pitavastatin-induced thrombomodulin expression by endothelial cells acts via inhibition of small g proteins of the rho family"Arterioscler Thromb Vasc Biol.. 23(3). 512-517 (2002)
• [Publications] Ishii H, Tezuka T, Ishikawa H, Takada K, Oida K, Horie S.: "Oxidized phospholipids in oxidized low-density lipoprotein downregulate thrombomodulin transcription in vascular endothelial cells through a decrease in the binding of RAR{beta}-RXR{alpha} heterodimers and Sp1 and 3 to their binding sequences in the TM promoter"Blood. (印刷中). (2003)