• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2002 Fiscal Year Annual Research Report

IkBアンチセンス遺伝子導入による肝虚血再灌流傷害抑制法の開発と肝移植への応用

Research Project

Project/Area Number 13671342
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

島津 元秀  慶應義塾大学, 医学部, 講師 (70124948)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 篠田 昌宏  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50286499)
高柳 淳  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80245464)
KeywordsIkB / NFkB / アンチセンス / 遺伝子導入 / 肝虚血再灌流傷害 / 肝移植
Research Abstract

昨年度報告したように,NFkB活性化の手段としてIkBのmRNAを不活化させるアンチセンス法を採用し,組み換えアデノウィルス法(cos-TPC法)によりIkB antisense cDNAを発現するアデノウィルスベクター(Adex IkB antisense)を作製した.まず,このAdex IkB antisenseを用いてin vitroで感染実験を行った.感染実験に用いた培養細胞は(1)ヒト肝癌細胞Hep-G2(2)ヒト腎癌細胞KU19-20(3)ヒト腎癌細胞Caki-1で,各培養細胞に対して20-40MOIのウィルスを感染させた.コントロールとしてAdexβgalを用い,また,Adex IkB senseの感染実験も行った.結果,感染2日目でのWesten blot法によるIkBの発現の確認ではantisense感染群で明らかな減少を認めなかった.RT-PCR法にてantisense cDNAが細胞内に確認されているにもかかわらずIkBが減少しなかった理由としてNF-kBに結合したIkBの安定性の問題,antisenseの蛋白合成阻害の不確実性などが考えられた.解決法として細胞内antisenseを定常的に存在させることによりIkB発現を抑えることをねらい,2日毎にAdex IkB antisenseを再感染させ,1週間後にIkBを定量したところ,やはりIkBの蛋白発現を安定して抑えることができなかった.また,同時にEMSA法によるNFkBの核内活性化蛋白の定量を行ったが,やはりantisense感染によるNFkBの活性化を誘導することができなかった.同時に進めていたin vivo(ラット)によるウィルス感染による肝温虚血再灌流傷害モデル実験でもコントロール群に比べ肝障害を軽減することができなかった.

  • Research Products

    (6 results)

All Other

All Publications (6 results)

  • [Publications] Tanabe M, Shimazu M, Wakabayashi G, et al.: "Intraportal infusion therapy as a novel approach to adult ABO-incompatible liver transplantation"Transplantation. 73. 1959-1961 (2002)

  • [Publications] Kawachi S, Shimazu M, Wakabayashi G, et al.: "Biliary complications in adult living donor liver transplantation with duct-to-duct hepaticocholedochostomy or Roux-en-Y hepaticojejunostomy biliary"Surgery. 132. 48-56 (2002)

  • [Publications] Shinoda M, Shimazu M, Matsuda S, et al.: "c-Jun N-terminal kinase activation during warm hepatic ischemia/reperfusion injuries in a rat model"Wound Repair Regen. 10. 314-319 (2002)

  • [Publications] Shinoda M, Shimazu M, Wakabayashi G, et al.: "Tumor necrosis factor suppression and microcirculatory disturbance amelioration in ischemia/reperfusion injury of rat liver after ischemic preconditioning"J Gastroenterol Hepatol. 17. 1211-1219 (2002)

  • [Publications] Yoshida M, Wakabayashi G, Ishikawa H, et al.: "Arteriovenous shunting blood flow in the stomach is intravitally observed only ofter thermal injury in rats"Keio J Med. 51. 193-200 (2002)

  • [Publications] Harada H, Wakabayashi G, Takayanagi A, et al.: "Transfer of the Interleukin-1 receptor antagonist gene into rat liver abrogates hepatic ischemia-reperfusion injury"Transplantation. 74. 1434-1441 (2002)

URL: 

Published: 2004-04-07   Modified: 2016-04-21  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi