マクロファージ機能の制御による実験的ぶどう膜炎抑制モデルの作成

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13671814
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 岩渕 和也 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助教授 (20184898)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小竹 聡 北海道大学, 医学部・附属病院, 講師 (00186694)
• Keywords: マクロファージ / ぶどう膜炎 / MCP-1 / トランスジェニックマウス / 単クローン抗体 / ベーチェット病モデル / 実験治療

Research Abstract

ヒトβアクチンプロモーターでヒトMCP-1(hMCP-1)の発現を駆動するトランスジェニックマウス(Tgm)を3系統確立した。このうち2系統は血中に10ng/ml以上、1系統は5〜6ng/mlでヒトMCP-1蛋白をいずれも高濃度で発現していた。前者のhMCP-1 Tgmを用いて、ぶどう膜炎の抑制にケモカイン、特にMCP-1を標的とすることが可能か検証する目的で、同Tgmを用いた実験的自己免疫性ぶどう膜炎(EAU)マウスモデルを解析した。EAUはTgm、non-Tgm(ともにC57BL/6(B6)の背景)あるいはB6の頚部背側、腰部背側にhuman interphotoreceptor retinoid-binding protein peptide 1-20+完全フロイントアジュバント100μlを投与し、同日百日咳毒素0.1μg/マウスを腹腔内投与することによって誘導した。
その結果、感作後19日目の段階ではぶどう膜炎発症眼がnon-Tgmでは1/10(10%)であるのに対し、Tgmでは9/20(45%)とTgmで早期の発症を認めた。一方感作後23日目では、Tgmでは85%、Non-Tgmでも70%、clinical scoreでは、Tgm ; 1.8、non-Tgm ; 1.3であった。EAUのピーク時においては、Tgm、non-Tgmともにスコア2前後となり、またその後の症状の消退においても、両者で差は認められなかった。すなわち、TgmにおいてはEAUピーク時の重症度は増強されないが、発症が促進されることが判明した。
上記の結果を踏まえ、B6マウスを用いて、抗MCP-1抗体によるぶどう膜炎の発症抑制(遅延)が可能かを解析した。ぶどう膜炎の誘発は同様に、抗MCP-1抗体投与は5μg/マウス/日で連日(3週間)行った。その結果、確かに抗体投与により発症は遅延する傾向が認められた。また、そのメカニズムは不明であるが、抗体投与群で臨床スコアの改善が特に後期で顕著であった。
以上、13年度の結果から、MCP-1/CCR2系は、ぶどう膜炎発症抑制(遅延)の標的となり得ることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Kazuya Iwabuchi: "Defective development of NK1.1^+ T cell antigen receptor (TCR) αβ^+ cells in zeta-associated protein (ZAP)-70 null mice"Blood. 97. 1765-1775 (2001)
• [Publications] Naoki Ishimori: "Mixed allogeneic chimerism with wild type strains ameliorates in apolipo protein E-deficient mice"J. Leukoc. Biol.. 69・5. 732-740 (2001)
• [Publications] Masaaki Niino: "Amelioration of experimental autoimmune encephalomyelitis in C57BL/6 mice by an agonist of peroxisome proliferator-activated receptor-γ"J. Neuroimmunol.. 116. 40-48 (2001)
• [Publications] Takako Kizaki: "Immunomodulation by acute cold stress : activation and apoptosis of murine peritoneal macrophage"Biophys. Biochem. Res. Commun.. 283. 700-706 (2001)
• [Publications] Ryuh-ichiro Ohwatari: "Serum level of macrophage migration inhibitory factor as a usuful parameter of clinical course in patients with Wegener's granulomatosis"Ann. Oto. Rhinol. Laryngol.. 110・11. 1035-1040 (2001)
• [Publications] Yoshiki Yanagawa: "Enhancement of stromal-derived factor-1 α induced chemotaxis of CD4/8 double positve thymocytes in mice"Immunology. 104. 43-49 (2001)
• [Publications] Keiko Watano: "Allograft inflammatory factor-1 augments interleukin-6, -10 and -12 productions in mouse macrophages"Immunology. 104. 307-316 (2001)
• [Publications] Norikatsu Mizumoto: "Analysis of contact hypersensitivity response in human monocyte chemo attractant protein-1 transgenic mice"Immunobiol.. 204. 477-493 (2001)
• [Publications] Jun-ichi Nagata: "Effects of water-soluble hemicellulose from soybean hull on serum antibody levels and activation of macrophage"J. Agri. Food Chem.. 49・10. 4965-4970 (2001)
• [Publications] Ryuh-ichiro Ohwatari: "Developmental and functional analysis of CD8^+NK1.1^+T cells in class I MHC restricted TCR transgenic mouse"Cell. Immunol.. 213. 24-33 (2001)
• [Publications] Yoshiki Yanagawa: "Activation of extracellular signal-related kinase by TNF-α controls the maturation and function of murine dendritic cells"J. Leukoc. Biol.. 71. 125-132 (2002)
• [Publications] Takako Kizaki: "Negative regulation of LPS-stimulated expression of inducible nitric oxide synthetase by AP-1 in macrophage cell line J774A.1"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 289. 1031-1038 (2001)
• [Publications] Shin Onodera: "Signaling pathways on the up-regulation of matrix metalloproteinase-13 in rat osteoblasts in response to macrophage migration inhibitory factor"J. Biol. Chem.. (印刷中). (2002)
• [Publications] Manabu Ato: "Augmented expression of TNF-α induced by lipopolysaccharide in spleen of human monocyte chemoattractant protein-1 transgenic mice"Immunology. (印刷中). (2002)
• [Publications] 中井 之人: "骨髄移植を用いた動脈硬化病巣進展の抑制"血圧. 9・7(印刷中). (2002)