2001 Fiscal Year Annual Research Report

アデノウイルスベクターを用いた舌筋、咀嚼筋における遺伝子発現制御機構の研究

Research Project

Project/Area Number	13671955
Research Institution	Tsurumi University
Principal Investigator	山根明鶴見大学, 歯学部, 講師 (20166763)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	大貫芳樹鶴見大学, 歯学部, 助手 (50288114) 三枝木泰丈鶴見大学, 歯学部, 助教授 (20046113)
Keywords	咬筋 / 舌筋 / マウス / ラット / インスリン様増殖因子 / インスリン様増殖因子結合蛋白質 / カルシニューリン / アデノウイルスベクター
Research Abstract	本年度は主に舌筋や咀嚼筋などの頭部骨格筋の分化、成熟、刺激や環境変化に対する適応時の遺伝子発現制御機構におけるIGFおよびそのシグナルの機能を明らかにすることを目的として、主に以下の実験を行った。実験1 胎齢13日のマウス胎仔より舌筋を摘出し、無血清、化学合成培養液中で8日間培養した。培養液中にIGF-I、IGF結合蛋白質及び結合蛋白質への結合能を弱めたIGF誘導体又はdes(1-3)IGF-Iを加えた。培養終了後、舌筋よりRNA抽出し、MyoDファミリーおよび骨格筋クレアチンキナーゼなど骨格筋特異的遺伝子のmRNAの発現量をCompetitive RT-PCR法を用いて測定した。またクリオスタットを用いて組織切片を作製し、速筋型ミオシン重鎖抗体を用いた免疫染色を行った。IGF-Iは舌横紋筋分化を促進した。IGF結合蛋白質はIGFを安定化し分解より守ることにより、また、遊離IGFの濃度を舌横紋筋細胞分化の至適濃度内に保つことによりIGFによる舌横紋筋分化を調節していることを明らかにした。実験2 離乳直後のマウスに固型飼料(CE-2)を与えて飼育した。マウスが6ヶ月齢に達した時に2群に分け、1群には固型飼料を与え続け、もう1群には粉末飼料と水を1:3の割合で混合した飼料を与えた。1週間後マウスを殺し、咬筋を摘出した。咬筋よりRNA抽出しミオシン重鎖、IGF、IGF受容体およびIGF結合蛋白質mRNAの発現量をCompetitive RT-PCR法を用いて測定した。粉末飼料を与えた群は、固型飼料群と比較して咬筋の速筋化と萎縮が起こっていた。この変化には主にIGF-IとIIのダウンレギュレーションが関与していることが示唆された。実験3 現在、IGFシグナル伝達経路のメンバーであるカルシニューリンのクローニングを終了し、ドミナントネガティブフォームを組み込んだアデノウイルスベクターを作成中である。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] YAMANE, A., OHNUKI, Y., SAEKI, Y.: "Developmental changes of nicotinic acetyicholine receptor in mouse tongue striated muscle"J. dent. Res.. 80・9. 1840-1844 (2001)
[Publications] SAITO, T., OHNUKI, Y., YAMANE, A., SAEKI, Y.: "Effects of diet consistency on the myosin heavy chain mRNAs of rat masseter muscle during postnatal development"Archs oral Biol.. 47・2. 109-115 (2002)
[Publications] AMANO, O., YAMANE, A., SHIMADA, M., KOSHIZUMI, U., NAKAMURA, T., ISEKI, S.: "Hepatocyte growth factor is essential for migration of myogenic cells and promotes their proliferation during the early periods of tongue myogenesis in mouse embryos"Dev. Dyn.. 223・2. 169-179 (2002)
[Publications] YAMANE, A., SAITO, T., OHNUKI, Y., SAEKI, Y.: "Changes in mRNA expression of nicotinic acetylcholine receptor subunits during embryonic development of mouse masseter muscle"Zool. Sci.. (in press).
[Publications] SAITO, T., OHNUKI, Y., SAEKI, Y., ISHIBASHI, K., YANAGISAWA, K., YAMANE, A.: "Postnatal changes in the nicotinic acetylcholine receptor subunits in rat masseter muscle"Archs oral Biol.. (in press).

2001 Fiscal Year Annual Research Report

アデノウイルスベクターを用いた舌筋、咀嚼筋における遺伝子発現制御機構の研究

Principal Investigator

山根 明 鶴見大学, 歯学部, 講師 (20166763)

Research Products

[Publications] YAMANE, A., OHNUKI, Y., SAEKI, Y.: "Developmental changes of nicotinic acetyicholine receptor in mouse tongue striated muscle"J. dent. Res.. 80・9. 1840-1844 (2001)

[Publications] SAITO, T., OHNUKI, Y., YAMANE, A., SAEKI, Y.: "Effects of diet consistency on the myosin heavy chain mRNAs of rat masseter muscle during postnatal development"Archs oral Biol.. 47・2. 109-115 (2002)

[Publications] AMANO, O., YAMANE, A., SHIMADA, M., KOSHIZUMI, U., NAKAMURA, T., ISEKI, S.: "Hepatocyte growth factor is essential for migration of myogenic cells and promotes their proliferation during the early periods of tongue myogenesis in mouse embryos"Dev. Dyn.. 223・2. 169-179 (2002)

[Publications] YAMANE, A., SAITO, T., OHNUKI, Y., SAEKI, Y.: "Changes in mRNA expression of nicotinic acetylcholine receptor subunits during embryonic development of mouse masseter muscle"Zool. Sci.. (in press).

[Publications] SAITO, T., OHNUKI, Y., SAEKI, Y., ISHIBASHI, K., YANAGISAWA, K., YAMANE, A.: "Postnatal changes in the nicotinic acetylcholine receptor subunits in rat masseter muscle"Archs oral Biol.. (in press).

山根明鶴見大学, 歯学部, 講師 (20166763)