2003 Fiscal Year Annual Research Report
アデノウイルスベクターを用いた舌筋、咀嚼筋における遺伝子発現制御機構の研究
Project/Area Number |
13671955
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Research Institution | Tsurumi University |
Principal Investigator |
山根 明 鶴見大学, 歯学部, 講師 (20166763)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大貫 芳樹 鶴見大学, 歯学部, 助手 (50288114)
三枝木 泰丈 鶴見大学, 歯学部, 助教授 (20046113)
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Keywords | マウス / 咬筋 / 萎縮 / インスリン様増殖因子 / 受容体 / 結合タンパク質 / 競合的PCR法 / 免疫組織化学 |
Research Abstract |
【緒言】インスリン様増殖因子(IGF)は骨格筋線維の萎縮、肥大などに重要な役割を果している。本研究では、咀嚼筋の1つである咬筋線維の萎縮におけるIGFの役割を明らかにすることを目的として、飼料性状を転換することにより萎縮を誘導したマウス咬筋におけるIGF、IGFRおよびIGFBPのmRNA発現量また、咬筋組織内での蛋白質の局在性を調べた。 【材料・方法】16匹の雄性ICR系マウスを6ヶ月齢に達するまで固形飼料で飼育し、その後8匹ずつ2群に分け、1群の飼料を液状飼料に転換した。1週間後、マウスを頚椎脱臼により殺し左右咬筋を摘出した。競合的RT-PCR法を行い左側咬筋に含まれるIGF-I、-II、IGFR1、2、IGFBP1〜6のmRNA発現量を計測した。また、右側咬筋より凍結切片を作製し、IGF-I、-II、IGFR1、2、IGFBP3〜6の抗体を用いて免疫染色を行い、咬筋組織におけるこれらの蛋白質の局在性を調べた。 【結果・考察】競合的RT-PCR法を行った結果から、液状飼料群のマウス咬筋において、IGF-I、-II、IGFBP5のmRNA発現量はそれぞれ30%(p<0.05)、56%(p<0.05)、38%(p<0.01)減少していることが示された。IGFR2のmRNA発現量は21%の増加を示した(p<0.01)。また、免疫染色の結果、IGF-1Iは神経組織に、IGF-II、IGFR2、IGFBP5は筋線維内の筋形質に局在していた。なお、IGFBP1、2は発現量が少ないため解析できなかった。IGFR1、IGFBP3、4、6のmRNAおよび蛋白質の発現に顕著な差は観察されなかった。これらの結果から、IGF-I、-II、IGFR2、IGFBP5が、飼料の転換によりマウス咬筋に誘導された萎縮に関与している可能性が考えられる。
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[Publications] FUKUI, T., YAMANE, A., KOMATSU, K., CHIBA, M.: "Restoration of mechanical strength and morphological of the periodontal ligament following orthodontic retention in the rat mandibular first molar"Eur.J.Orthod.. 25・2. 167-174 (2003)
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[Publications] SAITO, T., AKUTSU, S., URUSHIYAMA, T.et al.: "Changes in the mRNA expressions of insulin-like growth factors, their receptors and binding proteins during the postnatal development of rat masseter muscle"Zool.Sci.. 20・4. 441-447 (2003)
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[Publications] WAKANA, N., AKUTSU, S., YAMANE, A.: "Effects of clenbuterol, a b2-adrenergic agonist, on the myofibers diameter, fiber type, and expressions of insulin-like growth factors in the adult mouse masseter muscle"Jpn.J.oral Biol.. 45・6. 418-427 (2003)
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[Publications] URUSHIYAMA, T., AKUTUSU, S., MIYAZAKI, J.-I.et al.: "Change from a hart dot soft diet alters the expression of insulin-like growth factors, their receptors, and binding proteins in association with atrophy in adult mouse masseter muscle"Cell Tissue Res.. 315・1. 97-105 (2003)
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[Publications] YAMANE, A., AMANO, O., SLAVKIN, H.C.: "Insulin-like growth factors (IGFs), hepatocyte growth factor (HGF), and transforming growth factor α(TGFα) in mouse tongue myogenesis"Dev.Growth.Differ.. 45・1. 1-6 (2003)
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[Publications] 漆山登喜, 大貫芳樹, 阿久津覚誠, 三枝木泰丈, 山根明: "アガロースゲルを一次元電気泳動時に用いた二次元電気泳動法による筋タンパク質発現の解析"鶴見歯学. 29・3. 297-304 (2003)
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[Publications] YAMANE, A., AMANO, O., URUSHIYAMA, T.et al.: "Exogenous hepatocyte growth factor inhibits myoblast differentiation by inducing myf5 expression and suppressing myoD expression in an organ culture system of embryonic mouse tongue"Eur.J.oral Sci.. (in press).
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[Publications] SAITO, T., FUKUI, K., AKUTSU, S.et al.: "Effects of diet consistency on the expression of insulin-like growth factors, their receptors, and binding proteins during the development of rat masseter muscle soon after weaning"Archs.oral Biol.. (in press).
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[Publications] 山根 明, 永田純史, 阿久津覚誠, 天野 修: "増殖因子による舌横紋筋発生制御機構"J.oral Biosci.. (in press).