2002 Fiscal Year Annual Research Report
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13672119
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| Research Institution | Meikai University |
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Principal Investigator |
岡田 典久 明海大学, 歯学部, 講師 (40146220)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤沢 盛一郎 明海大学, 歯学部, 教授 (40014162)
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| Keywords | Methoxyphenol / Eugenol / ラジカル細胞障害 / アポトーシス / MnSOD / Cu / ZnSOD |
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| Research Abstract |
Eugenol(EUG)によるHL-60細胞の細胞毒性およびアポトーシス誘導の過程におげるSOD分子種のmRNAの発現とEUGの酸化的触媒効果を抗酸化物質を用いて検討し、以下の知見を得た。
1.EUGによるSOD分子種のmRNAへの影響
RT-PCR法で発現を調べたところ、2mM(この系のCC_<50> 0.38mM)で発現低下を示し、それ以上の濃度でのmRNAの抽出は困難であった。また、酸化により1mM以上でMn、Cu/ZnSOD mRNAの顕著な発現低下を示したが、0.5mM以下の濃度では影響は受けなかった。
2.抗酸化物質によるSOD分子種のmRNAへの影響
SH基含有抗酸化物質(各10mM)のグルタチオン(GSH)、システイン誘導体(NAC)の添加はEUGのMn、Cu/ZnSOD mRNAの発現を低下させたが、エチルエステル型GSH(GSHee)の添加では低下しなかった。
3.抗酸化物質による細胞障害性への影響
トリパンブルー色素排除試験で細胞障害性を調べたところ、EUG(2mM)はHL-60細胞の生細胞数をわずかに減少させたが、GSH、NAC、GSHee (各10mM)の添加はEUGの細胞障害活性を有意に促進させ、特にGSHeeで著しかった(2h後)。
4.ペルオキシダーゼによるSOD分子種のmRNAへの影響
ペルオキシダーゼ添加はEUGが細胞死誘導を発現させる初期過程でMn、Cu/ZnSOD mRNAの発現を増進させた。以上のことから、EUGは各種癌細胞にprooxldantとして作用することが示唆された。
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[Publications] 岡田典久: "Methoxyphenol類の細胞毒性とアポト-シス(2)-Mn-SODおよびCu/Zn-SOD mRNAの発現の変動-"歯科基礎医学会雑誌. 44・5. 185 (2002)
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[Publications] Seiichiro FUJISAWA: "Antioxidant and prooxidant action of eugenol-related compounds and their cytotoxicity"Toxicology. 177. 39-54 (2002)
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[Publications] Takako Ogiwara: "Radical scavenging activity and cytotoxicity of ferulic acid"Anticancer Res.. 22. 2711-2718 (2002)
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[Publications] Seiichiro FUJISAWA: "Kinetics evaluation of reactivity of flavonoids as radical scavengers"SAR, QSAR Environ Res.. 13. 617-627 (2002)
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[Publications] Seiichiro FUJISAWA: "Interaction between 2-ethoxybenzoic acid (EBA) and eugenol, and its cytotoxicity"J Dental Res.. 82. 43-47 (2003)
