2003 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮細胞の流れ刺激受容応答におけるリゾホスファチジン酸の役割

Research Project

Project/Area Number	13672400
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	大幡久之昭和大学, 薬学部, 助教授 (00119166)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山本雅幸昭和大学, 薬学部, 助手 (90307067)
Keywords	血管内皮細胞 / 機械受容応答 / リゾホスファチジン酸 / 機械受容チャネル / 細胞内Ca^<2+>イオン濃度 / 流れ刺激 / in situ
Research Abstract	昨年度までに活性リン脂質であるリゾホスファチジン酸(LPA)が,培養ウシ大動脈内皮細胞と同様にマウス大動脈組織標本においても,内皮細胞における流れ刺激受容の初期応答として,LPA濃度及び流れ刺激強度に依存した,特徴的な[Ca^<2+>]_i上昇現象(Ca^<2+> Spots)を誘発することを明らかにしてきた。本年度は、LPA存在下での流れ刺激による内皮細胞のCa^<2+>応答に平滑筋細胞がどのように反応するかについて、平滑筋細胞のCa^<2+>応答及び収縮反応を同時に可視化することにより検討した。ddY系雄性マウスの胸部大動脈を摘出後,血流方向に切り開き,fluo-4/AMを負荷した後,自作の流れ刺激負荷装置の流路部分に固定した。流れ刺激はシリンジポンプを用いて負荷し,個々の細胞のCa^<2+>応答は,多光子励起レーザー走査型蛍光顕微鏡システム(RTS200MP, Bio-Rad;Ti:S laser, Spectra-Physics)を用いて観察した(Ex;780nm,Em;450-600nm)。1μMLPA適用及び流れ刺激により内皮細胞のCa^<2+>応答と,それに遅れて平滑筋細胞のCa^<2+>オシレーションが観察され、ほぼ同時に平滑筋の長軸方向に沿った短縮が認められた。この変化は,同一視野でフェニレフリンを適用した場合と同様であったため、収縮反応であると結論した。このLPAの適用により収縮した血管は、流れ刺激の停止に伴って弛緩した。収縮反応は、内皮細胞を除去した血管では認められなかった。また、thromboxane A_2/PGH_2受容体拮抗薬のSQ-29548の前処置により収縮原応のみが抑制された。これらの結果より、流れ刺激存在下、LPAの適用により誘発される内皮細胞のCa^<2+>応答に引き続く血管の組織応答はthromboxaneA_2/PGH_2による収縮反応であり、内皮細胞の流れ刺激依存性のCa^<2+>応答を介する間接的な反応であることが示唆された。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Miyazaki, Takuro et al.: "Spontaneous and flow-induced Ca^<2+> transients in retracted regions in endothelial cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 281・1. 172-179 (2001)
[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Visualization of elementary mechanosensitive Ca^<2+>-influx events, Ca^<2+> spots, in bovine lens epithelial cells"J.Physiol (Lond). 532・1. 31-42 (2001)
[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Lysophosphatidic acid positively regulates the fluid flow-induced local Ca^<2+>-influx in bovine aortic endothelial cells"Circ.Res.. 88・9. 925-932 (2001)
[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Physiological and pharmacological role of lysophosphatidic acid as modulator in mechanotransduction"Jpn.J.Pharmacol.. 87・3. 171-176 (2001)
[Publications] Hashimoto, Terumasa et al.: "Role of Rho-associated protein kinase and histamine in lysophosphatidic acid-induced airway hyperresponsiveness in guinea pigs"Jpn.J.Pharmacol.. 88・3. 256-261 (2002)
[Publications] 百瀬和享, 他: "メカニカルストレス応答による細胞機能制御-創薬と再生臓器開発への応用"日薬理誌. 121・2. 103-111 (2003)
[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Calcium imaging in blood vessel in situ employing two-photon excitation fluorescence microscopy."J.Pharmacol.Sci.. 93・3. 242-247 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮細胞の流れ刺激受容応答におけるリゾホスファチジン酸の役割

Principal Investigator

大幡 久之 昭和大学, 薬学部, 助教授 (00119166)

Research Products

[Publications] Miyazaki, Takuro et al.: "Spontaneous and flow-induced Ca^<2+> transients in retracted regions in endothelial cells"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 281・1. 172-179 (2001)

[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Visualization of elementary mechanosensitive Ca^<2+>-influx events, Ca^<2+> spots, in bovine lens epithelial cells"J.Physiol (Lond). 532・1. 31-42 (2001)

[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Lysophosphatidic acid positively regulates the fluid flow-induced local Ca^<2+>-influx in bovine aortic endothelial cells"Circ.Res.. 88・9. 925-932 (2001)

[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Physiological and pharmacological role of lysophosphatidic acid as modulator in mechanotransduction"Jpn.J.Pharmacol.. 87・3. 171-176 (2001)

[Publications] Hashimoto, Terumasa et al.: "Role of Rho-associated protein kinase and histamine in lysophosphatidic acid-induced airway hyperresponsiveness in guinea pigs"Jpn.J.Pharmacol.. 88・3. 256-261 (2002)

[Publications] 百瀬和享, 他: "メカニカルストレス応答による細胞機能制御-創薬と再生臓器開発への応用"日薬理誌. 121・2. 103-111 (2003)

[Publications] Ohata, Hisayuki et al.: "Calcium imaging in blood vessel in situ employing two-photon excitation fluorescence microscopy."J.Pharmacol.Sci.. 93・3. 242-247 (2003)

大幡久之昭和大学, 薬学部, 助教授 (00119166)