MAPKカスケードのスカフォールドタンパク質による選択的伝達機構とクロストーク

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13680723
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 伊藤 道彦 北里大学, 理学部, 講師 (90240994)
• Keywords: JNK / JSAP1 / JNKBP1 / MAPキナーゼ / スカフォールドタンパク質 / MAPKカスケード / シグナル伝達 / 選択的活性化

Research Abstract

本研究は、哺乳類細胞における増殖、分化あるいは細胞死の細胞内シグナル伝達に重要な機能を担うMAPKカスケードの選択的伝達機構とカスケード間のクロストーク機構を解明することを目的として、本年度は、アポトーシスやストレス応答に関与するMAPKカスケードの1つJNKカスケードにおいて、そのキナーゼメンバーと結合し足場となるスカフォールドタンパク質(JSAP1およびJNKBPファミリー)の解析を行ったので以下に記す。
1.マウスJSAP1の解析.JSAP1は細胞への遺伝子導入による一過的発現系において、JNKカスケードのシグナル伝達を正に、ERKカスケードのそれを負に調節している。そこで実際にJSAP1の発現が認められるマウス脳やP19EC細胞において、内在性JSAP1と相互作用している因子を同定するために抗JSAP1抗体を用いた免疫沈降を行った。現在、特異的にJSAP1と共沈する何種類かのタンパク質を精製しプロテオーム解析を行っている。平成14年度にはさらに増殖、分化あるいはアポトーシス刺激に伴うJSAP1複合体の構成員の変化を調べ、それらの情報をもとにMAPKの選択的活性化やカスケード間のクロストークにおける機能解析を行う予定である。
2.マウスJNKBPの解析,JNKおよびp38両カスケードのスカフォールドタンパク質と機能している可能性があるJNKBP1のファミリーメンバー(JNKBP2)の単離を試みた。cDNAクローンの単離、解析からJNKBP2はアミノ酸配列でJNKBP1と50%程度の相同性があり、またそのmRNAは精巣特異的に発現が認められ、発現時期の解析から精子形成に関与する可能性が示唆された。平成14年度には、アポトーシスやストレスの際に流れるJNK、p38カスケードのシグナル伝達におけるJNKBP1とJNKBP2の機能を比較検討する予定である。

Research Products

• [Publications] Katsuji Yoshioka: "Scaffold proteins in mammalian MAP kinase signalling pathways"Recent Research Developments in Molecular and Cellulor Biology, Research Signpost. (in press).
• [Publications] Atsushi Enomoto: "Involvement of c-Jun NH2-terminal kinase-1 in heat-induced apoptotic cell death of human monoblastic leukaemia U937 cells"International Journal of Radiation Biology. 77・8. 867-874 (2001)
• [Publications] Mizuho Akechi: "Expression of JNK scaffold protein JSAP1 in the mouse nervous system"Neuroscience Research. 39・4. 391-400 (2001)