2002 Fiscal Year Annual Research Report

ラビリンチュラ類微生物における新規DHA生合成機構の解明

Research Project

Project/Area Number	13760072
Research Institution	Hiroshima University
Principal Investigator	秋庸裕広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 助教授 (80284165)
Keywords	ドコサヘキサエン酸 / 不飽和化酵素 / ラビリンチュラ / ポリケチド / 脂肪酸合成酵素
Research Abstract	DHA生産性海洋微生物ラビリンチュラ類の新規単離株を材料として,DHA生合成に関わる酵素群の遺伝子を探索した。真核生物に共通するDHAなど高度不飽和脂肪酸の生合成においては,脂肪酸不飽和化酵素が重要である。その特徴的な構造として3つのヒスチジンクラスターが存在するので,その配列をもとにしてオリゴプラィマーを設計して単離株cDNAライブラリーを鋳型としたPCRを行ったところ,オレイン酸をリノール酸に変換するΔ12不飽和化酵素及びリノール酸をγ-リノレン酸に変換するΔ6不飽和化酵素にそれぞれ対応すると思われる遺伝子断片が得られた。さらにドコサペンタエン酸をDHAに変換するΔ4不飽和化酵素をコードすると考えられる遺伝子断片も得られており,5'-RACE法などによって全長遺伝子を取得しているところである。一方,ラビリンチュラにおいて遺伝子導入や機能解析を行っていく上で,形質転換系の開発が不可欠である。そこで,相同組換え的に遺伝子を導入するための多コピー遺伝子として18S rRNA遺伝子を単離し,塩基配列を決定した。また,外来遺伝子発現用のプロモーター・ターミネーターを同遺伝子から取得するために,inverse PCRによる単離を試みているところである。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Enzymatic preparation of glycerides rich in docosahexaenoic acid from thraustochytrid single cell oils by Candida rugosa lipase"J. Oleo Sci.. 51. 447-455 (2002)
[Publications] Y.Tanaka, T.Aki, et al.: "Purification and characterization of a novel fungal α-glucosidase from Mortierella alliacea with high starch-hydrolytic activity"Biosci. Biotech. Biochem.. 66. 2415-2423 (2002)
[Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Grouping newly isolated docosahexaenoic acid-producing thraustochytrids based on the polyunsaturated fatty acid profiles and comparative analysis of 18S rRNA genes"Mar. Biotech.. (in press). (2003)
[Publications] T.Aki, K.Hachida, et al.: "Thraustochytrid as a potential source of carotenoids"J. Am. Oil Chem. Soc.. (in press). (2003)
[Publications] K.Inagaki, T.Aki, et al.: "Evidences of isozymes for Δ6 fatty acid desaturase in rat hepatocyte"Biosci. Biotech. Biochem.. (in press). (2003)
[Publications] Y.Michinaka, T.Aki, et al.: "Differential response of two Δ6 fatty acid desaturases from Mucor circinelloides to low temperature"Appl. Microbiol. Biotechnol. (in press). (2003)
[Publications] 日本油化学会編(分担執筆): "油化学便覧"丸善. 686 (2001)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

ラビリンチュラ類微生物における新規DHA生合成機構の解明

Principal Investigator

秋 庸裕 広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 助教授 (80284165)

Research Products

[Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Enzymatic preparation of glycerides rich in docosahexaenoic acid from thraustochytrid single cell oils by Candida rugosa lipase"J. Oleo Sci.. 51. 447-455 (2002)

[Publications] Y.Tanaka, T.Aki, et al.: "Purification and characterization of a novel fungal α-glucosidase from Mortierella alliacea with high starch-hydrolytic activity"Biosci. Biotech. Biochem.. 66. 2415-2423 (2002)

[Publications] J.Huang, T.Aki, et al.: "Grouping newly isolated docosahexaenoic acid-producing thraustochytrids based on the polyunsaturated fatty acid profiles and comparative analysis of 18S rRNA genes"Mar. Biotech.. (in press). (2003)

[Publications] T.Aki, K.Hachida, et al.: "Thraustochytrid as a potential source of carotenoids"J. Am. Oil Chem. Soc.. (in press). (2003)

[Publications] K.Inagaki, T.Aki, et al.: "Evidences of isozymes for Δ6 fatty acid desaturase in rat hepatocyte"Biosci. Biotech. Biochem.. (in press). (2003)

[Publications] Y.Michinaka, T.Aki, et al.: "Differential response of two Δ6 fatty acid desaturases from Mucor circinelloides to low temperature"Appl. Microbiol. Biotechnol. (in press). (2003)

[Publications] 日本油化学会編(分担執筆): "油化学便覧"丸善. 686 (2001)

秋庸裕広島大学, 大学院・先端物質科学研究科, 助教授 (80284165)