2001 Fiscal Year Annual Research Report
芳香族アミノ酸特異的輸送系Tの分子クローニングと機能解析
| Project/Area Number |
13770049
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
|
| Research Institution | Kyorin University |
|---|
Principal Investigator |
金 徒慶 杏林大学, 医学部, 助手 (40327474)
|
|---|
| Keywords | アミノ酸輸送系 / 芳香族アミノ酸 / 輸送系T / クローニング / ツメガエル卵母細胞 / Na^+-非依存 / 促通拡散型 / 上皮輸送 |
|---|
| Research Abstract |
輸送系T(system T)は、Na^+-非依存的に芳香族アミノ酸を輸送するアミノ酸輸送系であり、種々の細胞で存在が確認されてきたが、その分子実体は明らかにされていなかった。我々は、その分子実体を明らかにすることを目的として、ラット小腸mRNAを材料とし、発現クローニングを行った。ラット小腸由来のmRNAのサイズ分画の結果、2.2〜2.6kbに^<14>C-トリプトファン取り込みのピーク活性を見い出した。その画分よりcDNAライブラリーを作製し、ツメガエル卵母細胞に発現させ、^<14>C-トリプトファン取り込みを指標にスクリーニングすることにより、機能活性を有するクローンを単離した。単離したクローンは、12回膜貫通領域を有すると予想される514アミノ酸からなる新規タンパク質(TAT1:T-type amino acid transporter 1と命名)をコードしていた。TAT1は、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、L-ドーパ等の芳香族アミノ酸をNa^+-非依存的に輸送する促通拡散型のトランスポーターであり、古典的輸送系Tの性質を備えていた。TAT1を介するトリプトファンの取り込みは、基質アミノ酸のN-メチル体及びN-アセチル体により抑制されたが、メチルエステルによっては抑制されず、TAT1は基質アミノ酸をアニオンとして認識することが示唆された。TAT1は、ラットでは小腸、大腸、胎盤、肝に発現が検出された。特異抗体を作製し免疫組織化学的検討を行ったところ、小腸では、上皮細胞の血管側膜に存在することが明らかになった。TAT1は、芳香族アミノ酸及び類似薬物の上皮輸送における血管側への出口として機能しているものと考えられる。
|
Research Products
(6 results)
-
[Publications] Do Kyung Kim(金徒慶): "Expression cloning of a Na^+-independent aromatic amino acid transporter with structural similarity to H^+/monocarboxylate transporters"Journal of Biological Chemistry. 276(20). 17221-17228 (2001)
-
[Publications] Ken'Ichi Mizoguchi: "Human cystinuria-related transporter : Localization and functional characterization"Kidney International. 59. 1821-1833 (2001)
-
[Publications] Ju Young Kim: "Human cystine/glutamate transporter : cDNA cloning and upregulation by oxidative stress in glioma cells"Biochimica et Biophysica Acta. 1512. 335-344 (2001)
-
[Publications] Osamu Yanagida: "Human L-type amino acid transporter 1 (LAT1) : characterization of function and expression in tumor cell lines"Biochimica et Biophysica Acta. 1514. 291-302 (2001)
-
[Publications] Arthit Chairoungdua: "Identification and characterization of a novel member of the heterodimeric amino acid transporter family presumed to be associated with an unknown heavy chain"Journal of Biological Chemistry. 276(52). 49390-49399 (2001)
-
[Publications] Do Kyung Kim(金徒慶): "The human T-type amino acid transporter 1(TAT1) : characterization, gene organization and chromosomal location"Genomics. 79(1). 95-103 (2002)
