2001 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
13770135
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Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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Research Institution | Nagasaki University |
Principal Investigator |
和田 昭裕 長崎大学, 熱帯医学研究所, 助手 (70253698)
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Keywords | ヘリコバクター・ピロリ / 病原性遺伝子群 / NF-κB |
Research Abstract |
cag Pathogenicity Island(PAI)を持つヘリコバクター・ピロリが宿主の胃上皮細胞のNF-κBを顕著に活性化する。そこで、約30の遺伝子からなるcagPAI中のいかなる因子が宿主の胃上皮細胞のNF-κBを活性化させるのか明らかにする目的で、cagPAI中の遺伝子をPCR法にて分取して動物細胞発現ベクターに組み込んだ。組み込む際に、タイプ4分泌機構を構成する遺伝子、シグナルペプチドを持つ遺伝子(唯一打ち込まれる蛋白であるCagAはシグナルペプチドを持たないから)を除外した。従って、これらに属さないcagPAI中の15遺伝子を動物細胞発現ベクターに組み込んだ(HP520,521,523,526,530,531,533,534,535,536,541,543,546,548,549)。作製した発現ベクターをNF-κBのレポーター遺伝子と同時にMKN45細胞にトランスフェクションをおこない、NF-κBの活性を調べた。その結果、HP533のみが弱いNF-κBの活性化を示した。そこで、この活性が有意な活性化かどうか明確にするために、HP533の遺伝子をMKN45細胞にトランスフェクションし、培養液中に分泌されるIL-8の量をELISAにて定量したが、特に培養上清中には有意なIL-8の分泌は認められなかった。従って、他の残りの遺伝子が可能性を追求している。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Wada A et al.: "Helicobactor pylori-mediated transcriptional regulation of human β-defensin-2 gene requires NF-κB"Cell.Microbiol.. 3. 115-123 (2001)
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[Publications] Takahashi A et al.: "Production of β-defensin-2 by human colonic epithelial cells induced by salmonella enteritidis flagella filament structural protein"FEBS Letters. 508. 484-488 (2001)
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[Publications] Ogushi K et al.: "Salmonella enteritidis FliC (flagella filament protein) induces human β-defensin-2 (hBD-2) mRNA production by Caco-2 cells"J.Biol.Chem.. 276. 30521-30526 (2001)
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[Publications] Hamanaka Y et al.: "Expression of human β-defensin-2 (hBD-2) in Helicobacter pylori-induced gastritis : antibacterial effect of hBD-2 against H. Pylori"Gut. 49. 481-487 (2001)
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[Publications] Suzuki J et al.: "Dynamin is involved in human epithelial cell vacuolation caused by the Helicobacter pylori-produced cytotoxin VacA"J.Clin.Invest.. 107. 363-370 (2001)
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[Publications] Mori N et al.: "Induction of monocyte chemoattractant protein 1 by Helicobacter pylori involves NF-κB"Infect.Immun.. 69. 1280-1286 (2001)