Kupffer細胞の固形がん細胞株に対する抗腫瘍効果の検討 Kupffer細胞による固形がん肝転移制御をめざして

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13770712
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Research Institution: Tokyo Medical University
• Principal Investigator: 和田 建彦 東京医科大学, 医学部, 助手 (20307367)
• Keywords: Kupffer細胞 / 抗腫瘍効果 / Apoptosis / Fas ligand / Fas-Fas ligand system

Research Abstract

1.ラットKupffer細胞の癌細胞株に対する抗腫瘍効果の証明
ラットよりKupffer細胞を分離し,あらかじめPO-labeled Brduにて標識しておいたJurkat(Fas発現株)およびcolon26(Fas発現未確認)と2〜6時間混合培養した.混合培養終了後,細胞DNAフラグメンテーションELISAキット(Roche)を用いてJurkat細胞株およびcolon26細胞株のApoptosisを測定したところ,細胞株単独培養に比し有意にApoptosisが増加していた.また,4時間混合培養が両細胞株ともapoptosisが強かった.さらに,Kupffer細胞と癌細胞株の混合比は1:0.1がもっとも強いapoptosisiが認められた.
2.Anti-Fas ligand抗体による上記抗腫瘍効果の阻害実験
上記癌細胞株のKupffer細胞によるapoptosisiはanti-Fas ligand抗体添加にてisotypeの抗体添加に比し,有意に低下した.このことはKupffer細胞がFas-Fas ligandシステムを介して癌細胞株にapoptosisを誘導している可能性を示唆していると考えられた.
3.ラットKupffer細胞のFas ligand発現の証明
RT-PCR法およびWesternblottingにてラットKupffer細胞にmRNAおよび蛋白レベルでのFas ligandの発現が確認された.
4.Colon26細胞株のFas発現の証明
Westernblottingにてcolon26細胞株にFasの発現が確認された.