2001 Fiscal Year Annual Research Report
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13780637
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Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
山口 瞬 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70304087)
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| Keywords | 時計遺伝子 / 体内時計 / 概日リズム / トランスジェニックマウス |
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| Research Abstract |
生きたままのマウスの脳で遺伝子の発現をリアルタイムに観察することを目的にc-fosプロモーターに短時間半減期型のGFPをつないだトランスジェニックマウスの作成を行ってきた。c-fosプロモーターは本来のc-fosと同様の発現をすることが知られている、約7.8Kbの領域を用いた。GFPは生体内で約2時間の半減期と考えられているものを使用した。マウスの受精卵にマイクロインジェクション法でDNAを注入し、トランスジェニックマウスを作成した。既に、5ライン以上を確立し、それぞれのラインのマウスを用いて解析を行っている。夜間、マウスに光を30分照射し、照射後30分後にマウスの脳を取り出し、視交叉上核でのGFP mRNAの発現をin situ hybridizationにより解析した。その結果、全てのラインで、光照射により、視交叉上核に著明なGFP mRNAの誘導を認めた。さらにそのうちの1ラインについては、蛍光顕微鏡による観察で視交叉上核の神経細胞の細胞体が蛍光を発することを確認した。今後これらのマウスを用いて、視交叉上核に光ファイバーを挿入し、生きたマウスで発光を計測することで、遺伝子発現をリアルタイムに観測する。また、Cry1/Cry2ダブルノックアウトマウス、Clockミュータントマウスなどのリズム異常マウスとかけあわせることで、これらのマウスにおけるc-fos遺伝子の反応性を解析する。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Mitsui S. et al.: "Antagonistic role of E4BP4 and PAR proteins in the circadian oscillatory mechanism"Genes Dev.. 15. 995-1006 (2001)
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[Publications] Nishiyama K. et al.: "Tyrosine hydroxylase and NADPH-diaphorase in the rat nodose ganglion : colocalization and central projection"Acta Histochem Cytochem.. 34(2). 135-141 (2001)
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[Publications] Ishida Y. et al.: "Constitutive expression and delayed light response of casein kinase I epsilon and I delta mRNAs in the mouse suprachiasmatic nucleus"J Neurosci Res.. 64(6). 612-616 (2001)
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[Publications] Asai M.et al.: "Visualization of mPer1 transcription in vitro : NMDA induces a rapid phase shift of mPer1 gene in cultured SCN"Current Biol.. 11(19). 1524-1527 (2001)
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[Publications] Taguchi K. et al.: "Different circadian expression profiles of clock genes in the mouse suprachiasmatic nucleus"Biomed Res.. 22(3). 125-131 (2001)
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[Publications] 山口瞬: "哺乳類時計遺伝子の転写制御"細胞工学. 20(6). 811-816 (2001)
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[Publications] 岡村均 他: "実地診療に役立つヒトのリズム 時間診療学"永井書店. 268 (2001)
