2001 Fiscal Year Annual Research Report
分裂酵母を用いた哺乳動物細胞周期チェックポイントの再構築
Project/Area Number |
13877020
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Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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Research Institution | Nagoya City University |
Principal Investigator |
中西 真 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (40217774)
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Keywords | 分裂酵母 / 細胞周期 / チェックポイント / Cdc2 / サイクリン / Cdc25 / Cdk2 |
Research Abstract |
癌あるいは老化等の染色体不安定症候群の原因の1つである細胞周期チェックポイント異常の分子基盤を明らかにする目的で、分裂酵母内で哺乳動物細胞システムの再構築を試みた。具体的には、分裂酵母Cdc2遺伝子をそれぞれヒトCdc2,Cdk2,Cdk4,Cdk6分子に置き換えたものを作成した。しかしながら、Cdc2およびCdk2に置換したものは生存したが、Cdk4およびCdk6に置換したものについては致死的であると考えられた。またCdc2あるいはCdk2に置換したものも生存可能であるが、その分裂能は野生株と比較して非常に低下していた。この可能性として分裂酵母のcyclin分子がヒトCdc2あるいはCdk2は結合が弱く、またCdk4およびCdk6とは全く結合しない可能性が考えられた。従って、現在ヒトサイクリンB, A, D1をそれぞれ強発現した分裂酵母株を作成し、これらを用いて分裂酵母Cdc2をヒト型Cdc2,Cdk2,Cdk4,Cdk6と置き換えることを試みている。サイクリンBについては分裂酵母サイクリンと置き換える事が可能と考えられているので、サイクリン/Cdc2の両方ともヒト型に遺伝子置換したものを作成し、この変異体の分裂能およびチェックポイント機構の異常について解析を行っている。次年度はさらにCdc25およびWee1等のチェックポイント制御因子についてもヒト型に置換していく予定である。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Kobayashi, Y.: "Hydrocephalus, situs inversus, chronic sinusitis, and male infertility in DNA polymerase lambda-deficient mice : possible implication for the pathogenesis of immotile cilia syndrome."Mol. Cell. Boil.. (in press). (2002)
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[Publications] Ding, X.: "Different hepatitis B virus genotype distributions among asymptomatic carriers and patients with liver diseases in Nanning, southern China."Hepatol Res.. 22. 37-44 (2002)
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[Publications] Touitou, R.: "A degradation signal located in the C-terminus of p21WAF1/CIP1 is a binding site for the C8 a-subunit of the 20S proteasome."EMBO J.. 20. 2367-2375 (2001)
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[Publications] Buscemi, G.: "Nbs1 dependence of Chk2 activation after DNA-damage."Mol. Cell. Biol.. 21. 5214-5222 (2001)
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[Publications] Burgers, P.M.: "Eukaryotic DNA polymerases : proposal for a revised nomenclature"J. Biol. Chem.. 274. 43487-43490 (2001)
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[Publications] Harris, T.E.: "C/EBPacooperates with p21 to inhibit cdk2 kinase activity and induces growth arrest independent of DNA binding"J. Biol. Chem.. 276. 29200-29209 (2001)
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[Publications] Yoneda, K.: "Regulation of aquaporin-4 expression in astrocytes"Mol. Brain Res.. 89. 94-102 (2001)
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[Publications] Ding, X.: "Hepatitis B virus genotype distribution among chronic hepatitis B virus carriers in Shanghai, China"Intervirology.. 44. 43-47 (2001)