2001 Fiscal Year Annual Research Report
HIVの感染前期過程をモニターする系の確立とその阻害宿主因子の探索
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13877047
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
前田 洋助 熊本大学, 医学部, 助教授 (30284764)
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| Keywords | HIV / ウイルス複製 / 前期過程 / 感染抵抗性 |
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| Research Abstract |
HIVの細胞指向性は受容体であるCD4および補助受容体、CCR5とCXCR4により決定されていると考えられている。しかしながらHIVはすべてのCD4陽性細胞に威染可能なわけではない。その理由は種々のウイルス複製過程に宿主側因子が関与しているためと考えられる。今回特にウイルス複製の前期過程に絞り、ウイルス侵入、逆転写、プレインテグレーションコンプレックスの形成および核移行、さらにインテグレーションまでの過程でその複製ステップを負に制御している分子が存在するかどうか検討する目的でインテグレーションまでのウイルス前期過程に限局した感染系を樹立した。すなわち5'-LTRの転写制御エレメントを欠失し、Tat非依存的プロモーターにリポーター遺伝子としてルシフェラーゼをつないだHIV(se1f-inactivating HIV)を感染させ、リポーター活性上昇によりインテグレーションまでの前期過程をモニターした。またウイルス侵入効率を一定にするためエンベロープとしてVSV-Gを使用した。その結果LTRのプロモーター欠失にょり低下した感染細胞におけるルシフェラーゼ活性はHuman Elongation Factorプロモーターにより回復した。このウイルスよる感染後のルシフェラーゼ活性は同じCD4陽性T細胞株間でも10倍以上の差があることが確認され、細胞によりウイルス侵入後の過程での感染効率に違いがあることが判明した。現在リポーターとしてルシフェラーゼをHSVのThymidine Kinaseに置換したウイルスを作製し、感染前期過程特異的感染抵抗細胞株を選択し、どのような過程に制限があるのか検討中である。
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[Publications] Foda M: "Role of V3 independent domains on a dualtropic human immunodeficiency virus type-1(HIV-1) envelope gp120 in CCR5 coreceptor utilization and viral infectivity"Microbiol Immunol. 45. 521-530 (2001)
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[Publications] Song W: "Enhanced infection of an X4strain of HIV-1 due to capping and colocalization of CD4 and CXCR4 induced by capsianoside G, a diterpene glycoside"Biochem Biopys Res Comm. 283. 423-429 (2001)
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[Publications] Tempaku A: "Human T-cell luekamia virus type-I (HTLV-I) Tax is not the only one factor to enhance human immunodeficiency type-1 (HIV-1) infection in culture supematant"Virus Genes. 23. 77-80 (2001)
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[Publications] Maeda Y: "Involvement of both the V2 and V3 region of CCR5-tropic human immunodeficiency virus type-1 envelope for reduced sensitivity to macrophage inflammatory protein 1 alpha"J Virol. 74. 1787-1793 (2000)
