2001 Fiscal Year Annual Research Report
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13877048
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
齊藤 隆 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (50205655)
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| Keywords | 免疫シナプス / Cbp / EBP50 / raft / ERM / 細胞骨格 / T細胞活性化 / シグナル伝達 |
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| Research Abstract |
免疫応答は、T細胞が抗原提示細胞(APC)上の抗原ペプチド・MHC複合体をT細胞レセプター(TCR)によって認識することによって始まる。T-APCとのインターフェイスでは、中心にTCR複合体等が、辺縁にLFA1等が取り囲む免疫シナプスが形成され、raftも中心部に凝集し、シグナル伝達分子をリクルートして活性化シグナルを伝達する。免疫シナプスの形成制御機構を解析する目的で、raftに局在する分子Cbpに会合する分子の同定・解析を行った。CbpはCsk会合分子としてクローニングされたが、酵母2ハイブリッドによりCbp結合蛋白としてEBP50をクローニングした。In vitro会合実験および細胞内遺伝子導入によって、EBP50はN末でCbpと、C末でERMと会合することが判明した。蛍光ブリーチング法を用いて、Cbpを強発現させてCbp-EBP50結合を強めると、細胞膜上でのraftのmobilityが減少する事が解り、raft凝集の調節に関与することが示唆された。そこでスーパー抗原を用いて、免疫シナプス形成におけるCbp-EBP50-ERMシステムの役割を調べた。Cbp発現によってシナプス形成は強く抑制されたが、EBP50と会合できない変異Cbpには抑制活性がなかった。Jurkat細胞ではCbpはリン酸化されているが、TCR刺激によって脱リン酸化され、それに伴ってCbp-EBP50の結合が解離することを見出した。実際、TCR刺激によるIL-2の産生は、Cbp発現で抑制されたが、変異Cbpでは抑制されなかった。これらから、Cbp-EBP50-ERM会合は、raftを細胞骨格にアンカーさせ膜状のmobilityを低くしているが、TCR刺激によってCbp/EBP50/ERMが解離し、それによってraft凝集・免疫シナプス形成が誘導されやすくなることが明らかになった。
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Research Products
(9 results)
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[Publications] Arase, H.: "Negative regulation of expression and function of Fcγ RIII by CD3ζ in murine NK cells"J.Immunol. 166・1. 21-25 (2001)
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[Publications] Tomita, K.: "Cytokine-independent Jak3 activation upon TCR stimulation through direct association of Jak3 and the TCR complex"J.Biol.Chem.. 276・27. 25378-25385 (2001)
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[Publications] Arase, H.: "The mouse NK cell-associated antigen recognized by DX5 mAb is CD49β(α,integrin,VLA-2)"J.Immunol.. 167・3. 1141-1144 (2001)
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[Publications] Takeuchi, A.: "E2A and HEB activate the pre-TCRα promoter during immature T cell development"J.Immunol.. 167・4. 2157-2163 (2001)
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[Publications] Yamasaki, S.: "Docking protein Gab2 is phosphorylated by ZAP-70 and negatively regulates T cell recepor signaling by recruitment of inhibitory molecules"J.Biol.Chem.. 276・48. 45175-45183 (2001)
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[Publications] Itoh, K.: "Negative regulation of immune synapse formation by anchoring lipid raft to cytoskeleton through Cbp-EBP50-ERM assembly"J.Immunol.. 168・2. 541-544 (2002)
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[Publications] Azeredo da Silveira, S.: "Complement activation selectively potentiates the pathogenicity of the IgG2b and IgG3 isotypes of a high-affinity anti-erythrocyte autoantibody"J.Exp.Med.. (In press).
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[Publications] Ioan-Facsinay, A.: "FcγRI(CD64) contributes substantially to severity of artbritis, hypersensitivity responses and protection from bacterial infection"Immunity. (In press).
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[Publications] Yokosuka, T.: "Predominant role of TCRα chain in forming pre-immune TCR repertoire revealed by clonal TCR reconstitution system"J.Exp.Med.. (In press).
