2001 Fiscal Year Annual Research Report
川崎病の病因の未知抗体およびT細胞レセプター遺伝子探索に基づく画期的解明と展開
Project/Area Number |
13877118
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Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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Research Institution | Gifu University |
Principal Investigator |
近藤 直実 岐阜大学, 医学部, 教授 (50124714)
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Keywords | 川崎症 / B細胞 / VDJ領域 / CDR3 / T細胞クローン |
Research Abstract |
平成13年度は (1)川崎病患者でみられる抗体をコードしている免疫グロブリン遺伝子を決定するために川崎病患者末消リンパ球からDNAおよびRNAを採集し、RNAからはcDNAを作成した。DNAまたはcDNAを用いて、免疫グロブリン遺伝子のvariable regionのVDJとconstant regionのCγ部分のprimerを設定して、PCRまたはRT-PCRを用いて増巾させ、またnested PCRを行い、増巾バンドをPC19ベクターにてクローニングした。これから川崎病において使用されているV領域,CDR3領域の塩基配列の特性を決定し、さらにアミノ酸配列を決定した。 (2)川崎病におけるV領域のアミノ酸配列からコンピューターを用いて系統樹を作成したところ予想に反して幅広く分布していたが、一部に集積の傾向が認められた。この集積性が他の既知の抗原、溶連菌、ウイルスなどに対する抗体タンパクのV領域といかなる差異を有するか検討した。 (3)以上の結果をコンピューター分析することにより、幾つかの興味ある結果が得られ、さらに他の検索結果から、川崎病の病因候補の重要な1つとして溶連菌感染が示されつつある。 (4)川崎病患者と対比させるためβラクトグロブリン特異的T細胞クローンを樹立し、反応するT細胞レセプターのCDR3領域を決定した。同手法により、川崎病患者T細胞クローンの樹立を更にすすめ、次へのステップとした。
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[Publications] Kondo, N., Matsui, E., et al.: "Reduced interferon-gamma production and mutations of the interleukin-12 receptor beta(2) chain gene in atopic subjects"Int Arch Allergy Immunol. 124. 117-120 (2001)
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[Publications] Kondo, N., Matsui, E., et al.: "Review : Atopy and mutations of II-12 receptor β2 chain gene"Clin Exp Allergy. 31. 1189-1193 (2001)
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[Publications] Kondo, N.: "Clinical and genetic research of food allergy in childhood"Journal of Asthma Allergy and Clinical Immunology. 21. 1063-1065 (2001)
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[Publications] Terada, T., Kondo, N., et al.: "Analysis of Ig subclass deficiency : First reported case of IgG2,IgG4,and IgA deficiency caused by deletion of Cα1,ψCγ,Cγ2,Cγ4, and Cε in a Mongoloid patient"J Allergy Clin Immunol. 108. 602-606 (2001)
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[Publications] Terada, T., Kondo, N., et al.: "Fate of the mutated IgG2 heavy chain : lack of expression of mutated membrane-bound IgG2 on the B cell surface in selective IgG2 deficiency"Int Immunol. 13. 249-256 (2001)
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[Publications] Inoue, R., Kondo, N., et al.: "Identification of beta-lactoglobulin-derived peptides and class II HLA molecules recognized by T cells from patients with milk allergy"Clin Exp Allergy. 31. 1126-1134 (2001)
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[Publications] 近藤直実: "IgEクラススイッチ."メディカルレビュー社. 271 (2001)