2014 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトｉＰＳ細胞由来成熟肝細胞を用いたキメラマウスの作出と新規肝移植向上因子の同定
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13J02987
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
長基 康人 大阪大学, 薬学研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | iPS細胞 / 肝細胞 / 細胞シート工学 / キメラマウス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
これまでに作出されてきたヒトiPS細胞由来肝細胞を有したキメラマウスは、ヒト凍結肝細胞を移植した場合と比較して、生着効率が悪いことが問題とされている。そこで本研究では細胞シート工学技術を用いて、ヒトiPS細胞由来肝細胞シートを移植する検討を行った。まず、移植したヒトiPS細胞由来肝細胞の体内分布を調べるため、ヒトiPS細胞由来肝細胞シートを新規肝細胞シート移植法、もしくはヒトiPS細胞由来肝細胞懸濁液を経脾臓移植法により移植した。その結果、ヒトiPS細胞由来肝細胞シートを移植したマウスにおいてはマウス肝臓表面に接着したシート状のHLA陽性ヒト細胞が観察され、その他の臓器にはヒト細胞が観察されなかった。それに対し、ヒトiPS細胞由来肝細胞懸濁液を経脾臓移植法により移植したマウスにおいては、移植標的臓器である肝臓以外にも、脾臓、大腸においてHLA陽性ヒト細胞が検出された。以上の結果から、新機関細胞シート移植法は経脾臓移植法よりも移植細胞の生着位置の制御に優れていることが示唆された。また、移植後のヒトiPS細胞由来肝細胞シートの生体内安定性を評価するため、長期的な観察を行った。レシピエントマウスとして、前述と同様の処置を行ったマウスを用いた。マウス血清中のヒトアルブミン濃度を測定したところ、移植４週目まではマウス血清中ヒトアルブミン濃度が上昇したものの、その後はプラトーに達し、移植８週目まで大きな変化が見られなかった。このことはヒトiPS細胞由来肝細胞が移植直後は増殖するものの、肝障害が治まるにつれて増殖が止まっていくということ、移植されたヒトiPS細胞由来肝細胞はマウス生体内に長期的に生着可能であることを示唆している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本年度は、昨年度に開発した新規肝細胞移植法の評価を行った。その結果、この新規移植法により移植された細胞は目的部位に限局して生着していることが明らかとなった。このことから、この新規移植法はヒト肝キメラマウスの作出のみならず、再生医療への応用も可能であると考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
来年度には、本年度において開発した新規移植法を用いて、TK－NOGマウスに代表されるような肝障害免疫不全マウスにヒトiPS細胞由来肝細胞を移植することで、高い生着効率を示す新規ヒト肝キメラマウスの作製を試みる。
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[Journal Article] Efficient engraftmentof human iPS cell-derived hepatocyte-like cells in uPA/SCID mice by overexpression of FNK, a Bcl-xLmutant gene.2015
Author(s)
Nagamoto Y., Takayama K., Tashiro K., Tateno C., Sakurai F., Tachibana M., Kawabata K., Ikeda K., Tanaka Y., Mizuguchi H.
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Journal Title
Cell Transplant.
Volume: 24
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Prediction of inter-individual differences in hepatic functions and drug sensitivity by using human iPS-derived hepatocytes.2014
Author(s)
Takayama K., Morisaki Y., Kuno S., Nagamoto Y., Harada K., Furukawa N., Ohtaka M., Nishimura K., Imagawa K., Sakurai F., Tachibana M., Sumazaki R., Noguchi E., Nakanishi M., Hirata K., Kawabata K., Mizuguchi H.
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Journal Title
Proc. Natl. Acad. Sci. USA.
Volume: 111
Pages: 16772-16777
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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