ＣＤ４陽性ＣＤ２５陰性ＬＡＧ３陽性 制御性Ｔ細胞による抗体産生制御機構の解明

2014 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13J04186
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 森田 薫 東京大学, 医学系研究科, 特別研究員(DC1)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 制御性T細胞 / Egr2 / Egr3 / LAG3 / B細胞 / 自己抗体 / 全身性エリテマトーデス

Outline of Annual Research Achievements

1.「研究目的」: 制御性T細胞 (Treg)は自己および外来抗原に対する免疫寛容誘導に重要な役割を果たしている。当研究室ではその一つであるCD4陽性CD25陰性LAG3陽性Treg (LAG3+ Treg)を同定しており、転写因子Egr2がそのマスター制御遺伝子と考えられている。EGR2は自己免疫疾患である全身性エリテマトーデス(SLE)の疾患感受性遺伝子であり、T細胞特異的なEgr2コンディショナルノックアウト(Egr2CKO)マウスはSLE様症状を呈する。しかしその発症は緩徐であり、Egr3による機能補完が想定される。本課題ではＴ細胞特異的Egr2/Egr3ダブルCKO (Egr2/3DKO)マウスを作製し、Ｔ細胞におけるEgr2/Egr3の免疫恒常性維持機構を明らかにする。
2.「H26年度の研究成果」：H25年度にEgr2/3DKOマウスを作製し、Egr2/3DKOマウスがEgr2CKOマウスと比較して早期よりSLE様症状を呈し、脾臓において過剰な胚中心形成を引き起こすことを明らかにした。H26年度は病態機序に関してLAG3+ Tregの機能解析を中心に解析を行った。その結果LAG3+ Tregは抑制性サイトカインのTGF-β3を介してB細胞の抗体産生を抑制することが判明した。またEgr2/Egr3を欠損したLAG3+ TregではTGF-β3産生が著明に低下し、Egr2/3DKOマウスに野生型由来のLAG3+ Tregを移入すると過剰な胚中心形成を抑制した。
3.「研究成果の意義および重要性」：以上よりT細胞においてEgr2/Egr3は、特にLAG3+ Treg におけるTGF-β3を介した抗体産生抑制に重要な機能を果たしており、欠損することで自己免疫疾患発症に関与していることが明らかとなった。本知見は自己抗体産生機構における分子制御メカニズム解明の重要な礎となる。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

平成26年度はEgr2/3DKOマウスのSLE様症状とLAG3+ Tregの機能異常との関係に関して詳細に解析することができ、LAG3+ Treg はTGF-β3を介してB細胞の抗体産生抑制に寄与していること、TGF-β3産生においてEgr2/3 がきわめて重要な機能を果たしていることを明らかにし、当初の目的を達成した。LAG3+ TregによるTGF-β3を介した自己抗体産生制御機構に関する研究成果は論文として発表し（Nat Communications. 2015 Feb 19;6:6329）、同論文はNature Japanにおいて「注目の論文」に選出され高く評価された。

Strategy for Future Research Activity

平成27年度はLAG3+ TregのTGF-β3産生におけるEgr2/3の制御機構に関して詳細な解析(ChIP seq/ Luciferase assay/siRNAによる発現抑制実験/RNA sequencing 等)を行うことで、TGF-β3の産生機序を明らかにする。また、Egr2/3DKOマウスにおける過剰な胚中心肺中心形成に対するLAG3+ Tregの関与に関してさらに詳細な解析を行う。

Research Products

• [Journal Article] TGF-β3-expressing CD4+CD25(-)LAG3+ regulatory T cells control humoral immune responses (2015)
  • Author(s): Okamura T, Sumitomo S, Morita K, Iwasaki Y, Inoue M, Nakachi S, Komai T, Shoda H, Miyazaki J, Fujio K, Yamamoto K.
  • Journal Title: Nature Communications Volume: 6 Pages: 1-14
  • DOI: 10.1038/ncomms7329
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] LAG3+ T細胞 (2014)
  • Author(s): 森田 薫 藤尾 圭志 山本 一彦
  • Journal Title: 先端医学社 Volume: 2 Pages: 122-127
• [Presentation] The role of Egr2 and Egr3 on T cells in regulating humoral responses (2015)
  • Author(s): 森田 薫、岡村 僚久、井上眞璃子、岩崎由希子、住友秀次、藤尾圭志、山本一彦
  • Organizer: 日本リウマチ学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 2015-04-23 – 2015-04-25
• [Presentation] The role of Egr2 and Egr3 in regulating immune homeostasis (2014)
  • Author(s): 森田 薫、岡村 僚久、井上眞璃子、駒井俊彦、岩崎由希子、住友秀次、藤尾圭志、山本一彦
  • Organizer: 日本免疫学会学術総会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2014-12-10 – 2014-12-12
• [Presentation] 免疫恒常性維持における転写因子Egr2/Egr3の役割 (2014)
  • Author(s): 森田 薫、岡村 僚久、井上眞璃子、駒井俊彦、岩崎由希子、住友秀次、藤尾圭志、山本一彦
  • Organizer: 日本臨床免疫学会総会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] 自己免疫疾患発症制御機構における転写因子Egr2/Egr3の役割、口頭発表 (平成26年4月24日) 日本臨床免疫学会総会、免疫恒常性維持における転写因子Egr2/Egr3の役割、ポスター発表 (平 (2014)
  • Author(s): 森田 薫、岡村 僚久、井上眞璃子、岩崎由希子、藤尾圭志、山本一彦
  • Organizer: 日本リウマチ学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-24 – 2014-04-26
• [Patent(Industrial Property Rights)] TGF-β3の免疫抑制作用の同定 (2014)
  • Inventor(s): 藤尾圭志
  • Industrial Property Rights Holder: 藤尾圭志
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Industrial Property Number: 12B14Y002-1
  • Filing Date: 2014-11-28