2002 Fiscal Year Annual Research Report
RBタンパク質のリン酸化と分解を介した標的遺伝子選択的制御機構
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14033218
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
北川 雅敏 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北川 恭子 浜松医科大学, 医学部, 助手 (20299605)
内田 千晴 浜松医科大学, 医学部, 助手 (60223567)
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| Keywords | RBタンパク質 / 細胞周期 / 癌 / ユビキチン |
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| Research Abstract |
[研究目的]RB経路とp53経路は2大癌抑制経路と呼ばれ、その異常は細胞癌化に深く関与している。p53タンパク質はリングフィンガーを持つ癌遺伝子産物Mdm2によってユビキチン依存的分解を受けARFがそれを抑制的に制御している。一方でRBタンパク質の分解機構はほとんど不明であった。本研究ではRBタンパク質のユビキチンリガーゼの同定を目指し、RBタンパク質の分解機構を明らかにすることを目的とする
[方法と結果]RBタンパク質のユビキチン化を解析するためにin vivoおよびin vitroアッセイを構築した。この細胞内および再構成系でMdm2はRBタンパク質と結合してRBタンパク質を効率よくユビキチン化した。興味深いことにMdm2はRBファミリーの中でRBタンパク質だけを特異的にユビキチン化した。また、ARFはRBタンパク質のユビキチン化を抑制した。細胞にMdm2を過剰発現するとRBタンパク質の分解速度が亢進し、プロテアソーム阻害剤やドミナントネガティブMdm2で分解が阻害されることがわかった。さらにSaO2細胞を用いたRB経路の機能アッセイで、Mdm2によりRB経路が抑制されることが判明した。現在この新経路の細胞癌化における機能を検討している。Mdm2はRBタンパク質とp53のユビキチンリガーゼとして両タンパク質の分解を亢進し、RB経路とp53経路の撹乱を引き起こして効率よく細胞を癌化すると考えられる。一方でARFはその両方の分解を抑える機能を持つことから、さらにその重要性が確認された。RNAi法などを用いて今後さらに解析を進める予定である。
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[Publications] Uchida, C. et al.: "The role of Sp1 and AP-2 in basal and protein kinase A-induced expression of mitochondrial serine : pyruvate aminotransferase in hepatocytes"Journal of Biological Chemistry. 277. 39082-39092 (2002)
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[Publications] Mizuno, T. et al.: "Analyses in transfected cells and in vitro of a putative peroxisomal targeting signal of rat liver serine : pyruvate aminotransferase"Hitochem. Cell Biol.. 118. 321-328 (2002)
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[Publications] Matsumoto A. et al.: "Bisphenol a levels in human urine"Environ. Health Perspect.. 111. 101-104 (2003)
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[Publications] Katayama, K. et al.: "Cdk4/Cyclin D1 kinase, a universal and critical regulator of apoptosis"Anticancer Res.. 23. 235-244 (2003)
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[Publications] Inui, N. et al.: "High expression of Cks1 in human non-small cell lung carcinomas"Biochem. Biophys. Research. Communication. 303. 973-984 (2003)
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[Publications] Isse, T. et al.: "Diminished alcohol preference in transgenic mice lacking aldehyde dehydrogenase activity"Pharmacogenetics. 12. 621-626 (2002)
