2003 Fiscal Year Annual Research Report

RBタンパク質のリン酸化と分解を介した標的遺伝子選択的制御機構

Research Project

Project/Area Number	14033218
Research Institution	Hamamatsu University School of Medicine
Principal Investigator	北川雅敏浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	北川恭子浜松医科大学, 医学部, 助手 (20299605) 内田千晴浜松医科大学, 医学部, 助手 (60223567)
Keywords	ユビキチン / プロテアソーム / 癌抑制遺伝子産物 / 細胞周期 / RBタンパク質
Research Abstract	[研究目的] 本研究では、癌抑制遺伝子産物の分解亢進による細胞悪性化機構の解明を目指す。特にRB経路を制御する癌抑制遺伝子産物RBタンパク質の細胞内での分解機構を明らかにする。さらに、これらの癌抑制遺伝子産物の分解実行因子の発現亢進や、分解亢進に伴い発現が変化する細胞悪性化や予後不良のキー遺伝子を解明することを目指す。 [方法と結果] 我々はRBタンパク質に結合するタンパク質に注目し、RBタンパク質をユビキチン化する活性を持つものをin vivoのユビキチン化アッセイで検索した。その結果p53のユビキチンリガーゼであるMdm2がRBタンパク質に結合し、ユビキチン化することを見出した。興味深いことにMdm2はRBファミリーの中でRBタンパク質だけを特異的にユビキチン化しp107やp130はしなかった。また、癌抑制遺伝子産物ARFはMdm2の活性を阻害し、RBタンパク質のユビキチン化を抑制した。細胞にMdm2を過剰発現するとRBタンパク質の分解速度が亢進した。プロテアソーム阻害剤やドミナントネガティブMdm2あるいはMdm2のsiRNAによってRBタンパク質の分解が阻害された。また、RBタンパク質はMdm2ノックアウ卜MEFで蓄積し、ARFノックアウトMEFで発現低下(分解亢進)していた。SaO2細胞を用いたRB経路の機能アッセイで、Mdm2によりRB経路が抑制されることが判明した。また、 RBタンパク質をユビキチン化できない変異型Mdm2はソフトアガーフロニー形成能が低下していた.さらにMdm2が高発現しているヒト癌検体において、RBの発現量が低く、Mdm2によりRBの分解亢進が細胞癌化に寄与していることが判明した。

Research Products
(10 results)

All Other

All Publications (10 results)

[Publications] Katayama, K.et al.: "Cdk4/cyclin D1 kinase, a universal and critical regulator of apoptosis."Anticancer Res.. 23. 235-244 (2003)
[Publications] Tahara, K.et al.: "ΔFosB but not FosB induces delayed apoptosis Independent of cell proliferation in the Rat1a embryo cell line."Cell Death and Diff.. 10. 496-507 (2003)
[Publications] Inui, N.et al.: "High expression ofCks1 in human non-small cell lung carcinomas."Biochem.Biophys.Res.Commun. 303. 978-984 (2003)
[Publications] Hayakawa, M.et al.: "Evidence that reactive oxygen species do not mediate NF-κB activation."EMBO J.. 22. 3356-3366 (2003)
[Publications] Imaki, H.et al.: "Cell Cycle-dependent Regulation of the Skp2 Promoter by GA-binding Protein."Cancer Res.. 63. 4607-4613 (2003)
[Publications] Natsume, H.et al.: "β-Catenin/Tcf-1-mediated transactivation of cyclin D1 promoter is negatively regulated by thyroid hormone."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 309. 408-413 (2003)
[Publications] Togawa, A.et al.: "Ubiquitin-dependent degradation of Smad2 is increased in the glomeruli of rats with anti-thymocyte serum nephritis."Am.J.Pathol.. 163. 1645-1652 (2003)
[Publications] Hattori, T.et al.: "Cks1 is degraded via the ubiquitin-proteasome pathway in a cell cycle-dependent manner."Genes to Cells. 8. 889-896 (2003)
[Publications] Fukasawa, H.et al.: "Treatment with anti-TGF-ss antibody ameliorates progressive nephritis by inhibiting Smad/TGF-ss signaling."Kidney Int.. 65. 63-74 (2004)
[Publications] 北川雅敏(分担執筆): "ポストゲノムの分子生物学「細胞周期メカニズムの解明に向けて」(村上康文編)"化学同人社. 184 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

RBタンパク質のリン酸化と分解を介した標的遺伝子選択的制御機構

Principal Investigator

北川 雅敏 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)

Research Products

[Publications] Katayama, K.et al.: "Cdk4/cyclin D1 kinase, a universal and critical regulator of apoptosis."Anticancer Res.. 23. 235-244 (2003)

[Publications] Tahara, K.et al.: "ΔFosB but not FosB induces delayed apoptosis Independent of cell proliferation in the Rat1a embryo cell line."Cell Death and Diff.. 10. 496-507 (2003)

[Publications] Inui, N.et al.: "High expression ofCks1 in human non-small cell lung carcinomas."Biochem.Biophys.Res.Commun. 303. 978-984 (2003)

[Publications] Hayakawa, M.et al.: "Evidence that reactive oxygen species do not mediate NF-κB activation."EMBO J.. 22. 3356-3366 (2003)

[Publications] Imaki, H.et al.: "Cell Cycle-dependent Regulation of the Skp2 Promoter by GA-binding Protein."Cancer Res.. 63. 4607-4613 (2003)

[Publications] Natsume, H.et al.: "β-Catenin/Tcf-1-mediated transactivation of cyclin D1 promoter is negatively regulated by thyroid hormone."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 309. 408-413 (2003)

[Publications] Togawa, A.et al.: "Ubiquitin-dependent degradation of Smad2 is increased in the glomeruli of rats with anti-thymocyte serum nephritis."Am.J.Pathol.. 163. 1645-1652 (2003)

[Publications] Hattori, T.et al.: "Cks1 is degraded via the ubiquitin-proteasome pathway in a cell cycle-dependent manner."Genes to Cells. 8. 889-896 (2003)

[Publications] Fukasawa, H.et al.: "Treatment with anti-TGF-ss antibody ameliorates progressive nephritis by inhibiting Smad/TGF-ss signaling."Kidney Int.. 65. 63-74 (2004)

[Publications] 北川雅敏(分担執筆): "ポストゲノムの分子生物学「細胞周期メカニズムの解明に向けて」(村上康文 編)"化学同人社. 184 (2003)

北川雅敏浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)

[Publications] 北川雅敏(分担執筆): "ポストゲノムの分子生物学「細胞周期メカニズムの解明に向けて」(村上康文編)"化学同人社. 184 (2003)