2002 Fiscal Year Annual Research Report

蛋白質リン酸化酵素PKB/AktおよびPKCを介する細胞死と細胞周期の制御機構

Research Project

Project/Area Number	14033228
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	吉川潮神戸大学, バイオシグナル研究センター, 教授 (40150354)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	松崎秀紀神戸大学, バイオシグナル研究センター, 助手 (80335463) 山本利義神戸大学, バイオシグナル研究センター, 助手 (00324939)
Keywords	PKB / Akt / PKC / 蛋白質リン酸化酵素 / ストレス刺激 / 熱ショック / 転写因子 / 細胞死 / 過酸化水素処理
Research Abstract	PKB/AktおよびPKCは受容体刺激によりそれぞれ細胞膜脂質に由来するリピッドメッセンジャーにより活性化を受けることが知られている。私どもはこれまでにこれらの蛋白質リン酸化酵素が受容体刺激のみならず各種ストレス刺激によっても活性化を受けるとともに、ストレスによる細胞死および増殖の抑制作用に関与することを明らかにしている。そこで、本研究ではストレス刺激によるこれらの酵素の活性化の分子機構を検討し、その細胞死と細胞周期における役割の検討を試みた。PKB/Aktは細胞増殖因子シグナルによるその活性化に際しては活性化ループのリン酸化が必須であることが知られているが、熱ショックによる活性化にはリン酸化反応は必須ではなく、PKB/Akt分子の複合体形成を伴うことが示された。また、その標的分子であるフォークヘッド転写因子AFXのPKB/Aktについて、PKB/Aktによるリン酸化部位特異的抗体を作成して検討を行った結果、特定の残基のリン酸化がAFXの細胞内局在の制御および細胞死抑制に重要であることが明かとなった。一方、PKCのうちδ分子種は過酸化水素処理によりチロシンリン酸化を受け活性型に変換されるが、これらのリン酸化部位をペプチドマップ法および質量分析法により解析し、3ヵ所のチロシンリン酸化残基を検出し、それらのうち主要なリン酸化部位を同定した。また、過酸化水素処理によりPKCδ分子種は会合することを見い出した。そこで、今後は高発現細胞株を用いてこれらの蛋白質リン酸化酵素による細胞死と細胞周期の制御についてその作用との比較検討を行なうことを予定している。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Matsuoka, D.: "Activation of AtMEK1, an Arabidopsis mitogen-activated protein kinase kinase, in vitro and in vivo : Analysis of active mutants expressed in E.coli and generation of the active form in stress response in seedlings"Plant J.. 29・5. 637-647 (2002)
[Publications] Saito, N.: "The family of protein kinase C and membrane lipid mediators"J. Diabetes Complications. 16・1. 4-8 (2002)
[Publications] Oka, M.: "Dual regulation of phospholipase D1 by protein kinase C α in vivo"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 294・5. 1109-1113 (2002)
[Publications] Irie, K.: "Establishment of a binding assay for protein kinase C isozymes using synthetic C1 peptides and development of new medicinal leads with protein kinase C isozyme and C1 domain selectivity"Pharmacol. Ther.. 93・2-3. 271-282 (2002)
[Publications] Kikkawa, U.: "Protein kinase C δ. (PKCδ) : activation mechanisms and functions"J. Biochem.. 132・6. 831-839 (2002)
[Publications] Yamamoto, T.: "Throsine phosphorylation of protein kinase C"Methods in Molecular Biology, Protein Kinase C Protocols. (in press).
[Publications] Nishizuka, Y: "Historical overview : protein kinase C, phorbol ester and lipid mediators. Handbook of Cellular Signaling"Academic Press (in press).

2002 Fiscal Year Annual Research Report

蛋白質リン酸化酵素PKB/AktおよびPKCを介する細胞死と細胞周期の制御機構

Principal Investigator

吉川 潮 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 教授 (40150354)

Research Products

[Publications] Matsuoka, D.: "Activation of AtMEK1, an Arabidopsis mitogen-activated protein kinase kinase, in vitro and in vivo : Analysis of active mutants expressed in E.coli and generation of the active form in stress response in seedlings"Plant J.. 29・5. 637-647 (2002)

[Publications] Saito, N.: "The family of protein kinase C and membrane lipid mediators"J. Diabetes Complications. 16・1. 4-8 (2002)

[Publications] Oka, M.: "Dual regulation of phospholipase D1 by protein kinase C α in vivo"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 294・5. 1109-1113 (2002)

[Publications] Irie, K.: "Establishment of a binding assay for protein kinase C isozymes using synthetic C1 peptides and development of new medicinal leads with protein kinase C isozyme and C1 domain selectivity"Pharmacol. Ther.. 93・2-3. 271-282 (2002)

[Publications] Kikkawa, U.: "Protein kinase C δ. (PKCδ) : activation mechanisms and functions"J. Biochem.. 132・6. 831-839 (2002)

[Publications] Yamamoto, T.: "Throsine phosphorylation of protein kinase C"Methods in Molecular Biology, Protein Kinase C Protocols. (in press).

[Publications] Nishizuka, Y: "Historical overview : protein kinase C, phorbol ester and lipid mediators. Handbook of Cellular Signaling"Academic Press (in press).

吉川潮神戸大学, バイオシグナル研究センター, 教授 (40150354)