2003 Fiscal Year Annual Research Report
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14034241
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
杉野 弘 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (50211305)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
栗崎 晃 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助手 (60346616)
土田 邦博 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助教授 (30281091)
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| Keywords | アクチビン / フォリスタチン / マイオスタチン / FLRG / Smad / 歯牙形成 / 筋形成 |
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| Research Abstract |
TGF-βファミリーに属するアクチビンは中胚葉誘導活性を有する細胞増殖因子である。細胞膜を境にして細胞の内側と外側で複雑に調節を受けているアクチビンシグナル伝達系が、各種器官形成過程においてどのように制御されているかを明らかにすることを目的とした。
アクチビンの細胞内シグナル伝達因子の1つであるSmad3ノックアウトマウスに歯牙形成異常があることを見い出した。Smad3(-/-)マウスの下顎骨切歯のエナメルの厚さには変化はないが、下顎骨門歯のエナメル形成に顕著な異常が認められた。また、ミクロCT解析により、切歯、門歯ともにミネラル形成が顕著に低下していることが分かった。Smad3が歯牙形成において、エナメル形成、ミネラル化に関与することが示唆された。
骨格筋形成の負の制御因子であるマイオスタチン(GDF8)の新規フォリスタチン様因子(FLRG)を用いて、筋肉量の調節機構の解明に取り組んでいる。FLRG抗体を用いてFLRGの血液中での存在様式を検討したところ、血液中のFLRGは主としてマイオスタチンと結合して存在していることが分かった。そこで、FLRGが骨格筋に特異的に発現するトランスジェニック(TG)マウスを作製し、そのin vivo系での作用を検討した。MLC(ミオシン軽鎖プロモーター)の下流にFLRG cDNAを組み込み、数系統のラインを取得した。いずれのTGマウスも上碗三頭筋などにおいて2倍程度の筋肉量の増加が見られた。さらに、フォリスタチン分子中に存在する3個のFSドメインの組み合わせや配列順序を変異させることにより、アクチビンへの親和性が低下し、マイオスタチンにより特異的に結合するフォリスタチン変異体蛋白分子の作製に成功した。ついで、FLRGの場合と同様に、本変異体の骨格筋特異的発現TGマウスを作出した。現在、その表現型を詳細に解析している。
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[Publications] Arai, K.Y., et al.: "Characterization of rat follistatin-related gene (FLRG) : Effects of estrous cycle stage and pregnancy on its mRNA expression in rat reproductive tissues."Biol.Reprod.. 68. 199-206 (2003)
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[Publications] Yokozeki, M., et al.: "Smad3 is required for enamel biomineralization."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 305. 684-690 (2003)
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[Publications] Funaba, M., et al.: "Transcriptional activation of mouse mast cell protease-7 by activin and transforming growth factor-β is inhibited by microphthalmia-associated transcription factor."J.Biol.Chem.. 278. 52032-52041 (2003)
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[Publications] Wang, H.Q., et al.: "FLRG (follistatin-related gene) expression in human endometrium : sex steroid hormones regulated the expression of FLRG in cultured human endometrial stromal cells."J.Clin.Endo.& Metab.. 88. 4432-4439 (2003)
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[Publications] Tsuchida, K., et al.: "Novel factors in regulation of activin signaling."Mol.Cell.Endo.. in press.
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[Publications] Miyamoto, H.et al.: "Tumor-stromal interaction of human pancreatic cancer. Acquired resistance to anticancer drugs and proliferation are dependent on extracellular matrix (ECM) proteins."Pancreas. in press.
