2004 Fiscal Year Annual Research Report
Ewing肉腫の発がん機構の解明と分子標的治療の開発
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14207057
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
岩本 幸英 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (00213322)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小田 義直 九州大学, 大学院・医学研究院, 講師 (70291515)
田中 和宏 九州大学, 大学病院, 助手 (10274458)
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| Keywords | Ewing肉腫 / EWS-Fli1 / 融合遺伝子 / 細胞周期 / 分子標的 / p27 |
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| Research Abstract |
Ewing肉腫(ES)は悪性骨軟部腫瘍の中で最も生命予後不良な腫瘍の一つである。ES症例の90%以上で染色体転座t(11:22)(q24;q12)がみられ、その結果、異常な融合遺伝子EWS-Fli1が生じる。この融合遺伝子産物は強力な転写因子として働き、ESの発がん原因と考えられている。これまでに我々は、EWS-Fli1融合遺伝子はESの発がんのみならず、その生物学的性質をも規定している可能性があることを示してきた。さらに我々は、EWS-Fli1が癌抑制遺伝子Rbに関係した細胞周期制御因子(p27,p21,cyclin E)を標的とし、Rb経路を阻害することがES発がんに深く関与していることを明らかにした。しかし、ESではゲノムの守護神とも称されるp53が正常であることが多く、Rb経路の異常だけでESの発がんを説明することはできない。本研究の目的は、転写因子EWS-Fli1によってp53の機能がどうのように抑制されているかを解明し、ES発がん機構の全容を明らかにすること、さらに、そこに関わるEWS-Fli1の標的遺伝子を明らかにし、そのシグナル伝達経路を阻害することで、ES細胞の増殖等の悪性形質を有効に抑制できるか検討を加えること、である。
本年度は以下のような研究を行った。EWS-Fli1発現を効率よく抑制するためにRNA干渉法を用い、EWS-Fli1の切断点部分を含むsiRNAを設計した。このsiRNAを用いたEWS-Fli1の特異的、効果的な発現抑制について、各種のES細胞株、他の癌種細胞株、正常細胞等を用いて詳細に解析した。従来我々はEWS-Fli1の発現抑制にアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いていたが、siRNAはより強力にEWS-Fli1発現を抑制できた。siRNAによりEWS-Fli1発現をノックダウンすると、p27が著明に誘導され、細胞周期が停止したが、ES細胞にアポトーシスは誘導されず、細胞老化(senescence)が誘導されることが判明した。従って、EWS-Fli1によるES発がん機構として、細胞老化の回避があると推察された。これはこれまでに報告されていないEWS-Fli1の機能であり、ES発がん機構の解明と分子標的治療の開発研究に新しい視点を与えるものである。
今後さらに解析を進め、EWS-Fli1による発がん機能の全貌を明らかにする予定である。
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